HPLC法测定保婴丹中厚朴酚与和厚朴酚的含量
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摘要： 目的建立HPLC法测定保婴丹中厚朴酚与和厚朴酚的含量。方法采用Kromasil C18柱，以甲醇-水(78∶22)为流动相，检测波长为294 nm。结果厚朴酚在0.107 4~0.537μg范围内呈良好的线性关系(r＝0.999 9)，和厚朴酚在0.058 5~0.292 5μg范围内呈良好的线性关系(r＝0.999 7)，厚朴酚平均回收率为99.52%，和厚朴酚平均回收率为97.68%，RSD分别为1.97%和1.48% 。结论本方法准确、可靠、重现性好，可适用于保婴丹中厚朴酚与和厚朴酚的含量测定。
关键词：保婴丹；厚朴酚；和厚朴酚； HPLC；含量测定
中图分类号：O657.7+2文献标识码：A文章编号：1672-979X(2007)01-0024-02
Determination of Magnolol and Honokiol in Bao Ying Dan by HPLC
QIU Wei-fen1 , ZOU Yu-fan2
(1.Guangdong Research Institute of Traditional Chinese Medicine, Guangzhou 510520, China; 2.Guangdong Professional Institute of Chemical and Pharmaceutical Engineering, Guangzhou 510520, China)
Abstract：Objective To establish a HPLC method for the determination of magnolol and honokiol in Bao Ying Dan. Methods A Kromasil C18 column was employed with the mobile phase consisting of methanol - water (78∶22) and the determination wavelength was 294nm. Results The linear range of magnolol was 0.1074～0.537μg( r = 0. 9999) . The linear range of honokiol was 0.0585～0.2925ug ( r = 0. 9997) . The average recovery of magnolol was 99.52 % with RSD of 1.97%. The average recovery of honokiol was 97.68 % with RSD of 1.48%. Conclusion This method is accurate , reliable and reproducible. It can be used for the assaying of magnolol and honokiol in Bao Ying Dan.
Key words：Bao Ying Dan; magnolol; honokiol; HPLC; assaying
保婴丹由胆南星、钩藤、厚朴、琥珀、僵蚕等药物组成，具有清热祛燥、开胃消积的功效。临床上用于治疗婴儿肠胃燥滞，肠热便秘，以及受风热引起之惊风身热，手握拳头，坐立不安，夜睡惊。胃口不佳，饮食缓慢，多吃食滞，肚腹胀痛等症。犜曜嘉垂娑ê坎舛āN烁玫乜刂瞥善分柿浚疚牟握找┑涞纳滋跫㘚1]，对方中主药厚朴中的主要成分厚朴酚与和厚朴酚进行了含量测定方法研究。
1仪器与试药
Waters 2695高效液相色谱仪，Waters 2996二极管阵列检测器，Empower色谱工作站(美国Waters公司)；电子天平(德国Sartorius公司)；HS10260D型超声波清洗器(天津恒奥科技发展有限公司)。
厚朴酚与和厚朴酚对照品(中国药品生物制品检定所)；保婴丹(香港马百良药厂有限公司)；甲醇为色谱纯，水为双蒸水。
2方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱：Kromasil C18 (150 mm×4.6 mm，5μm)；流动相：甲醇∶水(78∶22)，流速1.0 mL/min；检测波长：294 nm。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取厚朴酚、和厚朴酚对照品适量，加甲醇分别制成每1 mL中含厚朴酚35 μg、和厚朴酚20 μg的溶液，即得。
2.3供试品溶液的制备
取本品约0.2 g，置10 mL量瓶中，加甲醇约8 mL，浸渍过夜，超声处理(功率260 W，频率40 kHz)30 min，放冷，用甲醇定容至量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。专属性谱图见图1。
t/min
图1厚朴酚与和厚朴酚测定的HPLC图
1. 样品2. 厚朴酚对照品3. 和厚朴酚对照品4. 阴性样品
2.4线性范围试验
分别精密量取浓度为35.8 μg/mL的厚朴酚对照液与19.5μg/mL的和厚朴酚对照液3，5，8，10，12，15 μL，按样品含量测定方法项下色谱条件测定峰面积。以峰面积为纵坐标，厚朴酚与和厚朴酚的浓度为横坐标分别绘制标准曲线，计算其回归方程，厚朴酚方程：Y=1.39×106X-5.15×103(r＝0.999 9)
和厚朴酚方程：Y=1.73×106X-5.19×103(r＝0.999 7)
2.5溶液稳定性试验
精密量取同一供试液10μL，在第0，2，4，6，8 h分别测定1 次，厚朴酚与和厚朴酚测定结果的RSD分别为 0.99%和0 ......
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