高速逆流色谱在天然产物分离中的应用
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摘要：高速逆流色谱是一种连续液-液色谱技术，具有无固相载体的优点。现将近年高速逆流色谱在天然产物分离中的应用作一介绍。
关键词：高速逆流色谱；天然产物；应用
中图分类号：O657.7文献标识码：A文章编号：1672-979X(2007)05-0024-04
Application of High-speed Counter-current Chromatography in Isolation of Natural Products
ZHAO Ying
(School of Pharmaceutical Sciences, Shandong University, Jinan 250012, China)
Abstract：High-speed countercurrent chromatography (HSCCC) is one kind of continuous liquid-liquid distribution chromatography with the unique feature of eliminating the use of a solid support. This paper reviews the application of HSCCC in the isolation of natural products.
Key words：high-speed countercurrent chromatography; natural product; application
20世纪80年代，美国国立卫生研究院(National Institutes of Health，NIH)Ito等在液-液分配色谱的基础上发明了高速逆流色谱(high-speed countercurrent chromatography，HSCCC)。HSCCC技术主要有离子对逆流色谱(ion-pair countercurrent chromatography)、pH区带逆流色谱(pH-zone-refining countercurrent chromatography)及多维逆流色谱(multidimensional countercurrent chromatography)[1]。HSCCC是一项高效快速的液-液分配色谱技术，由于该色谱无需固相载体支持，避免了因不可逆吸附而引起的样品损失、变性等问题，特别适用于分离(单离)极性物质和用其他分离方法易引起结构变化的物质。随着方法的改进[2]，用该法进行天然产物分离制备的量和纯度都有了极大的提高，国内外已广泛用于生物碱类、黄酮类、苷类等化合物的分离。现对HSCCC及其在天然产物分离中的应用作一介绍。
1HSCCC在天然产物分离中的应用
1.1生物碱类
Liu等[3]用HSCCC，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(5:5:7:5，v/v)为溶剂体系，从吴茱萸[Evodia rutaecarpa (Juss.) Benth.]分离纯化得到5个生物碱类化合物，纯度分别为98.7%，98.4%，96.9%，98.0%和97.2%。蒋凯等[4]用HSCCC，以氯仿-甲醇-0.2 mol/ L HCl(10:3:3，v/v)为溶剂系统，从黄花乌头[Aconitum coreanum (L鑦l.) Rapaics]分离并鉴定了8个C20二萜生物碱。
1.2黄酮类
Zhou等[5]用HSCCC从短瓣金莲花(Trollius ledebouri Reichb.)分离得到2个黄酮苷类、1个未知化合物(纯度均在97.0%以上)和1个部分纯化的组分(纯度为85.1%，随后用半制备型HPLC纯化)，其溶剂体系为乙酸乙酯-正丁醇-水(2:1:3，v/v)。土茯苓为百合科菝葜属植物光叶菝葜(Smilax glabra Roxb.)的干燥根茎，Du等[6]用制备型HSCCC对落新妇苷进行分离纯化，一次分离粗提物1.5 g，以正己烷-正丁醇-水(1:1:2，v/v)为溶剂体系，得到落新妇苷和异落新妇苷。利用HSCCC分离的其他黄酮类化合物见表1。
表 1利用HSCCC分离黄酮类化合物
1.3倍半萜
木香是菊科植物木香(Aucklandia lappa Decne)的干燥根，其中广木香内酯和去氢-α-姜黄烯具有抗菌、抗病毒和止痛等作用。Li等[16]用制备型HSCCC，以石油醚-甲醇-水(5:6.5:3.5，v/v)的上相作为固定相，成功分离纯化了广木香内酯和去氢-α-姜黄烯，纯度分别为100%和99.6%。Ma等[17]利用HSCCC从新疆一枝蒿(Artemisia rupestris L.)二氯甲烷提取物中分离得到一枝蒿酮酸，纯度大于98.0%，其中以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(6:4:3.5:6.5， v/v)的上相和0.5%的醋酸为固定相。Yan等[18]利用HSCCC从姜科植物温郁金(Curcuma wenyujin)根茎的挥发油中成功分离得到吉玛酮和莪术二酮，溶剂系统为石油醚-乙醇-乙醚-水(5:4:0.5:1，v/v)，纯度大于95.0%。
1.4醌类
紫草(Lithospermum erythrorhizon Sieb. et Zucc.)含萘醌类色素：紫草素、乙酰紫草素等，Lu等[19]用HSCCC，以正己烷-乙酸乙酯-乙醇-水(16:14:14:5，v/v)为溶剂体系，从52 mg紫草粗提物(含38.9%紫草素)中分离纯化得到紫草素19.6 mg(纯度为98 ......
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