三种麻醉剂对小鼠离体子宫平滑肌收缩性影响的比较
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摘要：目的探讨氨基甲酸乙酯、戊巴比妥钠、水合氯醛3种麻醉剂对小鼠离体子宫平滑肌收缩性的影响。方法将制备的小鼠离体子宫标本置入37 ℃低钙洛氏液，用BL-410生物机能实验系统记录加麻醉剂前、后及更换低钙洛氏液后各10 min的收缩曲线，测量收缩频率和收缩强度，计算运动指数。结果3种麻醉剂对子宫平滑肌的收缩频率、收缩强度、运动指数都有明显的抑制作用，去除麻醉剂后都可恢复收缩。水合氯醛的抑制作用最强，为完全抑制，去除麻醉剂后很长时间才能恢复收缩；戊巴比妥钠的抑制作用最弱，去除麻醉剂后很快恢复收缩，且收缩强度和运动指数的恢复率都最高。3种麻醉剂在抑制率、恢复率上大都呈现量-效关系。结论在以动物子宫为研究对象的实验中宜用戊巴比妥钠作为麻醉剂。
关键词：小鼠；子宫平滑肌；氨甲酸乙酯；戊巴比妥钠；水合氯醛
中图分类号：Q426文献标识码：A文章编号：1672-979X(2007)09-0014-05
氨基甲酸乙酯、戊巴比妥钠和水合氯醛是动物实验中常用的全身麻醉剂，都是通过腹腔或静脉注射进入血液，然后通过血液循环作用于靶器官而产生麻醉作用。本实验针对3种麻醉剂对效应器官(如胃、小肠、心脏、骨骼肌等)的影响，先后研究了对蟾蜍离体心脏生理特性[1]，蟾蜍在体心脏生理特性[2]，大鼠离体胃肠平滑肌收缩性[3]、蟾蜍离体骨骼肌收缩性[4]，蟾蜍离体坐骨神经电生理特性[5]的影响。结果表明，这3种麻醉剂对离体心脏及在体心脏的心率及收缩力，离体胃肠平滑肌的收缩力，离体骨骼肌的收缩幅度及收缩舒张速率、离体坐骨神经的传导速度及兴奋性都有不同程度的抑制作用。这3种麻醉剂对子宫平滑肌的影响与对胃肠平滑肌的影响的异同尚未见报道。本实验就3种麻醉剂对小鼠离体子宫平滑肌收缩性能的影响进行了比较，为进一步探讨麻醉剂的作用及其机制提供实验依据。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1实验动物选体重约30 g、未孕未经产的雌性昆明种小鼠44只(山东中医药大学实验动物中心提供)。设氨基甲酸乙酯、戊巴比妥钠、水合氯醛3组，每组分别为12，14和18只，每组设低、中、高3个浓度。
1.1.2实验仪器BL-410生物机能实验系统(成都泰盟科技有限责任公司)；JH-2型肌张力换能器(北京航天医学工程研究所)；501型超级恒温器(上海实验仪器厂)；BS200S型电子天平(北京赛多利斯天平有限公司)；小型空气泵；双层玻璃槽；L-型玻璃管。
1.1.3实验药品氨基甲酸乙酯(上海化学试剂公司)；戊巴比妥钠(进口分装，广州化学试剂厂)；水合氯醛(分析纯，北京精求化工有限公司)。
1.2方法
1.2.1不同浓度麻醉剂的配制方法鼠类在体实验时麻醉剂一般采用腹腔注射，由腹腔毛细血管吸收后通过血液循环运输到全身各处，最终均匀地分布到细胞外液。哺乳动物的细胞外液约占体重的20%~25%[6, 7]，按每千克体重200 mL细胞外液计算。鼠类麻醉时，氨基甲酸乙酯的正常腹腔注射剂量为1 g/kg体重，根据上述原理，此时细胞外液中氨基甲酸乙酯的浓度为0.5%，我们规定此浓度为中浓度；另外配制低浓度0.25%和高浓度1%以作比较。戊巴比妥钠(鼠类正常腹腔注射量为0.04 g/kg体重)的中浓度为0.02%，低浓度为0.01%，高浓度为0.04%；水合氯醛(鼠类正常腹腔注射量为0.4 g/kg体重)的中浓度为0.2%，低浓度为0.1%，高浓度为0.4%。各浓度麻醉剂均用低钙洛氏液[8]配制。
1.2.2小鼠离体子宫平滑肌标本的制备用颈椎脱臼法处死小鼠，迅速打开盆腔，取出子宫，轻轻剥离附着在子宫上的脂肪及结缔组织，在近卵巢端取长约0.5 cm的子宫段，移入盛有37℃低钙洛氏液的双层玻璃槽。
1.2.3仪器连接将离体子宫的阴道端固定于L-型玻璃管下端，用透明胶带将L-型玻璃管固定于装有低钙洛氏液的双层玻璃槽。离体子宫的卵巢端连接张力换能器，其信号输入BL-410生物机能实验系统。双层玻璃槽连接超级恒温器，设定温度37℃。用小型空气泵通过L-型玻璃管向双层玻璃槽内的低钙洛氏液缓慢地通入空气。
1.2.4小鼠离体子宫平滑肌收缩曲线描记用BL-410生物机能实验系统描记离体子宫平滑肌收缩曲线。参数设置：增益1 000；时间常数DC；滤波30 Hz；扫描速度32 s/div。标本在低钙洛氏液中稳定10 min后开始记录收缩曲线。先记录10 min正常收缩曲线，然后放掉低钙洛氏液，加入37℃含有麻醉剂的低钙洛氏液，记录10 min，观察麻醉剂对离体子宫平滑肌收缩的影响。用37℃低钙洛氏液冲洗3次后再加入37℃低钙洛氏液，记录10 min，观察子宫平滑肌收缩是否恢复。戊巴比妥钠的收缩曲线见图1。
1.2.5统计学分析统计加麻醉剂前10 min、加麻醉剂后10 min子宫平滑肌的收缩频率和收缩强度；统计去除麻醉剂更换低钙洛氏液后子宫平滑肌恢复收缩的时间，恢复收缩后10 min的收缩频率和收缩强度。因每个标本的基础张力(初长度)不同，故将每个标本加麻醉剂前的收缩强度作为标准收缩强度，即相对值为1，加麻醉剂后和更换低钙洛氏液后的收缩强度分别与加麻醉剂前的收缩强度相除，其值作为相对收缩强度，以此消除由于基础张力不同可能造成的影响。计算加麻醉剂前10 min、加麻醉剂后10 min、更换低钙洛氏液恢复收缩后10 min的子宫相对运动指数。相对运动指数=收缩频率 相对收缩强度。计算加麻醉剂后的抑制率和更换低钙洛氏液后的恢复率。抑制率=(加药前数据-加药后数据)/加药前数据×100%，抑制率=(加药前数据-加药后数据)/加药前数据×100%，恢复率=更换低钙洛氏液后数据/加药前数据×100%。数据以均数±标准差()表示。用SPSS11.5软件对加麻醉剂前与加麻醉剂后，加麻醉剂前与更换洛氏液恢复收缩后的各项指标进行paired-t检验比较各指标变化的显著性，P<0.05为统计学差异显著，P<0.01为统计学差异极显著。
2结果
2.13种麻醉剂对离体子宫平滑肌收缩频率的影响
见表1。
由表1可见，3种麻醉剂对离体子宫平滑肌的收缩频率均有抑制作用。以中浓度为例，水合氯醛的抑制作用最强，抑制率为100.00%；氨基甲酸乙酯的抑制作用次之，戊巴比妥钠的抑制作用最弱。氨基甲酸乙酯和戊巴比妥钠的低、中、高3个浓度表现为浓度越高抑制作用越强，呈量-效关系；水合氯醛3个浓度的抑制率则均为100.00%。
更换低钙洛氏液后，各组都能恢复收缩，戊巴比妥钠低浓度组立即恢复收缩，其它各组则需过一段时间才恢复收缩。以中浓度为例，戊巴比妥钠的恢复收缩时间最短，为30.21 s；氨基甲酸乙酯次之，水合氯醛最长；水合氯醛的收缩频率恢复率最高，为121.24%；戊巴比妥钠次之 ......
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