甘草中黄酮类抗氧化成分的提取工艺研究
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摘要：目的探讨甘草黄酮类抗氧化成分的最佳提取工艺。方法经L9(34)正交试验研究黄酮有效部位的最佳提取工艺，对提取部位的抗氧化活性条件筛选。结果最佳工艺为：90 %乙醇提取，1∶12的加液量，加热回流3次每次1.5 h。结论本实验确定的最佳提取工艺简便可行。
关键词：甘草；黄酮；提取工艺；抗氧化活性；正交试验
中图分类号：R284.2文献标识码：A文章编号：1672-979X(2008)09-0025-03
Study on Extraction Technology of Antioxidative Ingredients of Flavonoids in Radix et Rhizoma Glycyrrhizae
YU Peng-fei, WANG Jian-ping, JIANG Hai-qiang, KUANG Xiao-yan, ZHONG Wei-yan, WAN Xiao-shan
(Shandong University of Traditional Chinese Medicine, 250355 Jinan, China)
Abstract：Objective To investigate the optimal extraction technology of antioxidative ingredients of flavonoids in Radix et Rhizoma Glycyrrhizae. Methods The L9(34)orthogonal experimental design was used to investigate the optimal extraction technology of flavonoids, which was followed by the screening of antioxidative activity.Results The optimal extraction condition of flavonoids in Radix et Rhizoma Glycyrrhizae was the extraction with 12 times of 90 % alcohol for 3 times by heating reflux (1.5 hour each time). Conclusion The optimal extraction technology of flavonoids in Radix et Rhizoma Glycyrrhizae obtained in this study is convenient and feasible.
Key words：Radix et Rhizoma Glycyrrhizae; flavonoids; extraction technology; antioxidative activity; orthogonal experimental design
甘草(Radix et Rhizoma Glycyrrhizae)是我国特有的中药材之一，为乌拉尔甘草、光果甘草和胀果甘草的根及根茎，隶属豆科甘草属[1]。甘草药用有效成分为甘草酸、黄酮类化合物及其它水溶性浸出物、还原糖、淀粉、氨基酸、有机酸、生物碱和多种微量元素等[2]。
甘草黄酮类成分具有明显的抗氧化作用，可预防肿瘤发生，治疗胃溃疡、肝损害，在抗炎和抗变态反应等方面也有明显的药理作用[3]。为考察甘草中总黄酮含量与抗氧化活性的关系，我们对甘草黄酮类的活性成分进行了筛选，并优化了提取工艺。
影响甘草中黄酮类成分的因素有提取方式、洗脱方式、温度、提取时间等。通过预实验，分别考察比较了超声提取、回流提取、水提取与乙醇提取等，发现最佳提取方式是回流提取，提取液的合适浓度为70 %；最佳的层析部位是60 %乙醇洗脱部位。在进一步实验中，对溶媒浓度、提取时间、加液量和提取次数进行了正交分析[4]。
1材料与仪器
甘草(购自淄博鼎立中药材有限公司，经本院周凤琴教授鉴定为豆科甘草属光果甘草)；甘草粗提物(本实验室制备)。
芦丁对照品(中国药品生物制品鉴定所，批号：0080-9705)；D101型大孔树脂；U-3010型紫外分光光度计(Hitachi High-Technologies Corporation)；FA1104型万分之一电子天平(上海天平仪器厂)；AF240型10万分之一天平(中国瑞士梅勒公司)；KQ-250型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；试剂均为分析纯。
2实验方法
2.1黄酮含量与清除自由基能力关系的考察
2.1.1标准曲线的绘制芦丁标准溶液：精确称取芦丁对照品20.00 mg，置入100 mL容量瓶，加入甲醇10 mL，水浴溶解，冷却后，加蒸馏水至刻度。精密量取对照品溶液0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0 mL，分别置入25 mL容量瓶，各加水至6 mL，加5 % NaNO2 1 mL混匀，放置6 min，加入10 % Al(NO3) 3 1 mL ......
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