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编号:11817659
TAT-凋亡蛋白质制备与抗肿瘤活性研究
http://www.100md.com 2009年9月1日 高 鹏 赵 健 傅文彬 王富军 袁勤生 刘建文
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     摘要:目的 制备TAT-凋亡蛋白质并研究其抗肿瘤活性。方法将重组质粒pET-28b-TAT-vp3转入Ecoli BL21(DE3)中表达其蛋白质,利用Ni NTA亲和柱纯化目的蛋白质包涵体,纯化样品透析复性后研究其抗肿瘤活性。结果30℃时重组蛋白质包涵体表达量最高,尿素变性条件下用Ni-NTA亲和柱层析纯化包涵体,用500mmol/L咪唑溶液洗脱,从镍柱上解离的目标蛋白质纯度达到92%以上。MTT实验表明,纯化后蛋白质浓度10μg/mL时,HeLa细胞存活率降至42%(IC50=4.2μg/mL);动物实验表明,样品组抑瘤率可达到48.3%。结论大肠杆菌表达的TAT-凋亡蛋白质具有抗肿瘤效应。

    关键词:TAT-凋亡蛋白;包涵体表达;制备;抗肿瘤活性

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