HPLC测定静痛灵胶囊中天麻素的含量
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摘要：目的测定医院制剂静痛灵胶囊中的天麻素含量。方法采用高效液相色谱法，Diamomsil C18柱(250min×4.6mm，5μm)；流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液(3:97)；检测波长220m；流速1.0mL/min。结果天麻素进样量线性范围0.005 5～0.027 5mg/mL(r=0.9999)，平均回收率102.0%，RSD 2.3%。结论本法操作简便，结果准确，可以作为控制静痛灵胶囊质量的方法。
关键词；静痛灵胶囊；天麻素；高效液相色谱法；含量测定
中图分类号：R971+3
文献标识码：A
文章编号：1672-979X(2010)03-0112-03
静痛灵胶囊为医院制剂，经临床多年使用证明具有平肝潜阳，清脑宁神，熄风止痛的功效，用于治疗血管、神经、功能性头痛等。该制剂处方中的天麻具有息风止痉，平肝潜阳，通络止痛之功效，为该方君药，其中天麻素含量与药品质量密切相关。我们采用高效液相法测定胶囊中天麻素含量，方法简便易行，结果准确可靠，可用于该胶囊的质量控制。
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1 仪器、药品与试剂
1.1 仪器
LC-10ATvp高效液相色谱仪、CLASS-VP色谱工作站(日本岛津)。
1.2 药品与试剂
天麻素对照品(110807-200205)，由中国药品生物制品检定所提供；静痛灵胶囊(批号：071214，071218，071224)，由山东大学齐鲁医院药剂科制剂室提供；乙腈为色谱纯，重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Diamonsil Cis柱(5 p.m，4.6mm×1 50mm)；流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液(3：97)：流速1.0mL/min；检测波长220mm。理论板数按天麻素峰计算不低于3 000。
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2.2 线性与范围
精密称取天麻素对照品2.75mg，用乙腈-水(3：97)溶解制成浓度0.055mg/mL溶液，精密量取该溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL，分别置入10mL量瓶，用乙腈-水(3：97)稀释至刻度，摇匀，分别量取20μL，注入液相色谱仪，记录色谱图和峰面积。以对照品浓度为横坐标，对照品溶液主峰峰面积为纵坐标回归，结果天麻素浓度在0,005 5～0.027 5mg/mL的范围内呈线性关系，回归方程为Y=40 6 3 2145.45X+6 648.2，r=0.999 9。
2.3 专属性试验
2.3.1 样品溶液制备 精密称取研细的样品内容物约0.4g，置入具塞锥形瓶，精密加入10%甲醇溶液30mL，称定重量，超声提取40min，放冷再称定重量，用10%甲醇溶液补足减失的重量，滤过，取续滤液作为样品溶液。
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2.3.2 阴性对照溶液制备 按处方制备不含天麻的样品，按样品溶液制备方法制成阴性对照溶液。
2.3.3 精密量取对照品溶液、样品溶液和阴性对照 溶液各20/μL，在确定的色谱条件下进样，记录色谱图，见图1。由图1可见，阴性对照溶液对天麻素测定无干扰。
2.4 精密度试验
精密量取天麻素对照品溶液20μL，注入液相色谱仪，连续进样5次，记录主峰的峰面积，RSD 0.40%，表明测定方法精密度良好。
2.5 稳定性试验
取新鲜配制的样品溶液，在0，2，4，8，12h分别进样20μL，记录色谱图和天麻素峰的峰面积，RSD0.60%，表明样品溶液在12h内保持稳定。
2.6 重复性试验
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取同一批号样品(批号：071214)5份，分别制成供试品溶液ss，按含量测定法测定，结果天麻素平均含量1.06mg/g，RSD0.89%。
2.7 加样回收率试验
精密称取已知含量的静痛灵胶囊(批号：071214，天麻素含量1.06mg/g)6份，分别加入天麻素对照品适量，按上述供试品溶液的制备方法及色谱条件测定，结果见表1。测得天麻素平均回收率为102.0%，RSD 2.3%，表明测定方法准确可靠。
2.8 样品含量测定
取3批不同批号的样品，按照样品溶液方法处理，依法测定，结果见表2。
3 讨论
3.1 取天麻素对照品适量，加流动相溶解作为对照品溶液，以流动相为空白，在波长200～400nm范围内扫描得到吸收光谱，最大吸收波长220nm和270nm。220nm处峰高明显高于270nm处，根据实验结果和相关文献，选择220nm作为测定天麻素含量的检测波长。
3.2 用超声提取法制备样品溶液时，考察了溶剂浓度、溶剂用量及超声时间对样品含量的影响，最终确定样品的处理方法为10%甲醇溶液30mL超声提取40min。
3.3 该制剂为医院制剂，此前没有单一成分的含量控制指标，天麻素在该制剂中起重要作用，故选择其含量为质量控制指标。方法学实验证明，本方法基本可行。, http://www.100md.com(陈运玖 赵 亮 周 文)