外阴恶性肿瘤中P21\ILK及HPV 6/11\HPV 16/18的检测及意义(2)
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1.2主要试剂
一抗分别为鼠抗人P21单克隆抗体,鼠抗人ILK单克隆抗体,HPV 6/11、HPV 16/18原位杂交检测试剂盒(含生物素标记的HPV 6/11、HPV 16/18探针)和SP试剂盒。以上试剂均购自福州迈新公司。
1.3 实验方法
P21及ILK检测采用免疫组化SP法;HPV 6/11及HPV 16/18检测采用原位杂交法。实验步骤严格按说明书进行。
1.4 结果判定
P21及HPV 6/11、HPV 16/18均显示细胞核着色,光学显微镜下见到细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性染色;ILK在细胞内的阳性表达主要位于肿瘤细胞的胞质内,出现浅或棕黄(褐)色颗粒。评分方法:参照Fomwitz综合计分法并略加修改,行半定量分析:随机抽样在高倍镜下计数肿瘤细胞总数和阳性细胞个数,然后得出阳性细胞百分率,着色强度按多数阳性细胞呈现的染色程度分为4级:阴性(-),即阳性细胞数<1%,仅极个别细胞呈现轻度显色或者无显色;弱阳性(+),即阳性细胞数<10%且≥1%;强阳性(+++),即阳性细胞数>60%;中度阳性(++),即阳性细胞数介于弱阳性与强阳性两级之间。
1.5 统计学处理
数据经SPSS 10.0软件分析,用行×列联表χ2检验,各指标的相关关系用Spearman等级相关分析,P<0.05表示有显著性差异。
2 结果
2.1 P21及ILK在各组中的表达情况
P21在外阴恶性肿瘤组、VIN组中的阳性表达率显著高于正常组(P<0.05);ILK在外阴恶性肿瘤组中的阳性表达率显著高于VIN组(P<0.05),其在外阴恶性肿瘤组和VIN组中的阳性表达率均显著高于正常组(P<0.05)。见表1。
表1 P21和ILK在各组中的表达(例)
2.2 HPV 6/11、HPV 16/18在各组中的感染情况
外阴恶性肿瘤组和VIN组中HPV 6/11阳性表达率均显著高于正常组(P<0 ......
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