组织块法分离人脐带间充质干细胞的研究
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李铎 石钏 洪敬欣 孟恒星 韩俊领 张宇光 中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所;协和干细胞基因工程有限公司;
【摘要】目的:应用组织块法分离人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)并对其生物学特性进行研究。同时探讨在不同储存条件下的脐带是否对组织块法的分离成功率产生影响。方法:无菌条件下采集足月儿的脐带,应用组织块法分离hUC-MSCs,通过流式细胞术观察其免疫学、生长特性。脐带在常温条件和冷冻条件下储存后进行组织块法分离,观察细胞生长情况。结果:应用组织块法能获得贴壁生长的hUC-MSCs,流式细胞仪分析结果显示细胞高表达常见MSC表面分子CD105、CD73及HLA-ABC;低表达造血细胞表面标记CD34、CD45及HLA-DR。常温储存条件下,随着处理时间的延长,获得原代细胞数量下降;组织冷冻后可以获得hUC-MSCs。结论:组织块分离法可以获得贴壁生长的hUC-MSCs,并成功传代扩增;脐带采集后24 h内处理,hUC-MSCs获得数量及分离成功率高;随着处理时间延长,hUC-MSCs获得数量减少,分离成功率降低。
【关键词】 人脐带间充质干细胞 组织块分离法 生物学鉴定
【分类号】R329
间充质干细胞(MSC)来源于胚胎早期发育中胚层和外胚层,是一类具有高度自我更新和多向潜能的成体干细胞,在体外可以分化诱导为成骨、脂肪、神经等多种组织细胞[1-2]。具有向受损组织归巢并且修复、重建受损或病变的组织器官的特点[3-4],此外应用MSC作为细胞治疗的手段时由于其
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间充质干细胞(MSC)来源于胚胎早期发育中胚层和外胚层，是一类具有高度自我更新和多向潜能的成体干细胞，在体外可以分化诱导为成骨、脂肪、神经等多种组织细胞。
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