正交实验法研究山楂提取物对α-淀粉酶活性的影响(2)
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2.3 山楂提取物对α-淀粉酶促反应影响的正交试验
根据单因素试验结果，按照表2设计正交实验因素水平表，摸索最佳酶促条件。正交实验结果，见表3。
由表3可知，影响酶活的因素重要性依次为pH>山楂提取物浓度>温度。促进α-淀粉酶活力的最佳组合为A2B1C1，即pH为6.8，温度为40℃，加入稀释5倍的山楂提取物，即相当于加入生山楂量∶α-淀粉酶=88.900∶0.001，α-淀粉酶活力最高。
按照A2B1C1条件进行验证试验，平行3次，酶活力分别为687.521、685.241、688.275 mg/(g·5 min)，平均酶活力为687.021 mg/(g·5 min)，证明酶促反应实验的重复性好，酶活力高。
3 讨论
由于被动大量摄入谷物类、高蛋白类食物所致的食物结构不合理现象在婴幼儿中显得很突出，导致消化不良现象经常发生，由此引发了一系列的消化道疾病，因此，如果以消肉食的山楂和消化谷物类的α-淀粉酶制备成复合消化剂，可以同时解决蛋白质和淀粉类食物的消化不良问题。
作为生物催化剂的α-淀粉酶的活性受到很多因素的影响，其中最大的影响是pH值。添加了山楂提取物后，对其合适添加量的确定及温度也很重要。正交试验优化了这三个因素的影响。Ga2+对α-淀粉酶活性具有促进作用，本实验中对Ga2+浓度进行了试验，发现Ga2+浓度的变化不是主导因素。通过合理的工艺设计，可以将本实验中优化的配方与条件进行规模化生产。
本实验得到的最优条件是将山楂用12倍量60%的乙醇在90℃下回流提取2次，每次1 h，将滤液减压浓缩干燥既得山楂提取物；山楂提取物与α-淀粉酶的复合制剂配方为pH为6.8磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液溶解酶，温度不超过40℃，山楂提取物添加量为20%浓度，此配方可以制备成服用方便的口服液。
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(收稿日期：2011-06-13)
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