OVA-CdTe/ZnSe核壳量子点探针的制备及其应用(1)
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[摘要] 目的：制备CdTe/ZnSe核壳量子点标记卵清白蛋白(OVA)探针OVA-CdTe/ZnSe，并检测其特异性荧光示踪作用。方法：将CdTe/ZnSe核壳量子点与OVA偶联制备荧光探针，通过凝胶电泳和光谱分析鉴定偶联效果；然后示踪OVA致敏的小鼠外周血嗜碱粒细胞(BASO)表面IgE高亲和力受体FcεRI。结果：偶联OVA后的量子点分子量增加，荧光增强且荧光峰位从628 nm红移至635 nm。通过激光共聚焦显微镜能清晰观测到OVA-CdTe/ZnSe探针对BASO表面IgE-FcεRI复合物的荧光标记。结论：OVA-CdTe/ZnSe探针能示踪OVA特异性IgE-FcεRI复合物，此探针在OVA致敏动物模型的特异性IgE检测中具有一定应用价值。
[关键词] CdTe/ZnSe核壳量子点；免疫荧光标记；鸡卵清白蛋白；IgE
[中图分类号] R392-3 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2011)11(c)-019-03
Preparation and fluorescence-imaging application of OVA-CdTe/ZnSe core/shell quantum dots
NI Bin, HU Huajun*
Department of Pharmacy, College of Life Science, China Jiliang University, Zhejiang Province, Hangzhou 310018, China
[Abstract] Objective: To establish a method to detect the IgE-FcεRI on BASO cells by using CdTe/ZnSe core/shell quantum dots(QDs) immuno-fluorescence labeling technology. Methods: CdTe/ZnSe core/shell QDs were coupled to the OVA with N-hydroxysuccinimide (NHS). After confirmation by agarosegel electrophoresis method and spectra analysis, the coupled product (OVA-CdTe/Znse) was used to detect the IgE-FcεRI on BASO cells. Results: Spectra analysis showed that the fluorescence intensity of OVA-CdTe/Znse was enhanced and the emission peak underwent a red-shift from 628 nm to 635 nm. Confocal fluorescence microscopy further showed that OVA-IgE-FcεRI on BASO cells characterized by the red fluorescence. Conclusion: OVA-CdTe/Znse fluorescence probes can effectively recognize IgE-FcεRI on BASO cells, which can be used in allergic animal model for detecting OVA specific IgE.
[Key words] CdTe/ZnSe core/shell quantum dots; Immuno-fluorescence labeling; OVA; IgE
支气管哮喘(bronchial asthma，简称哮喘)属于过敏性疾病的一种，其发病机制复杂，目前全球约有3亿哮喘患者，被WHO列为四大顽症之一。鉴于人体试验的局限性，对哮喘的干预研究往往通过建立与人相似症状的动物模型来进行。常用的哮喘动物(大鼠、小鼠、豚鼠)模型都存在不足之处。如豚鼠致敏后的变态反应与人类的不同，其更多由IgG介导；大鼠、小鼠制作的哮喘模型能产生特异性IgE，可临床指征不明显[1]。因此有必要寻找和开发新的哮喘动物模型。但哮喘新模型的开发还面临一个具体问题，即除大鼠、小鼠、豚鼠外的其他实验动物在卵清白蛋白(OVA)致敏后，因缺乏血清OVA特异性IgE的检测试剂，使致敏效果难以判断，这也阻碍了新模型的开发[2]。根据外周血嗜碱粒细胞(BASO)表面的IgE高亲和力受体FcεRI的密度与血清IgE水平有较好的相关性[3]。可研制一种OVA荧光探针，用于对OVA致敏动物的外周血BASO细胞表面IgE高亲和力受体FcεRI进行荧光标记，通过其荧光示踪可知该动物的致敏效果。量子点(quantum dots，QDs)荧光标记技术是近些年发展起来的一项新型荧光示踪技术。本研究利用巯基丁二酸为表面修饰剂合成的水溶性CdTe/ZnSe核壳QDs与OVA偶联 ......
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