丙泊酚注射液细菌内毒素检查法研究(2)
 |
| 第1页 |
参见附件(1885KB，2页)。
2.5 干扰试验
根据预试验结果，选择两个厂家、λ为0.25 EU/mL的鲎试剂、丙泊酚注射液12倍稀释液作为供试品溶液，进行干扰试验。用供试品溶液及BET水分别将细菌内毒素工作标准品稀释成含2.00λ、1.00λ、0.50λ、0.25λ的溶液，每一浓度平行做4管，另取BET水和供试品溶液分别作阴性对照、供试品阴性对照，各平行做两管。按鲎试剂灵敏度度复核试验项下操作。见表3。
表3 丙泊酚注射液干扰试验结果
注：“+”表示反应为阳性，“-”表示反应为阴性
由表3的结果可知，用BET水和供试品溶液作阴性对照管、供试品阴性对照管，结果均为阴性，两组鲎试剂的Es为0.25 EU/mL，在0.5λ～2.0λ之间；Et在0.5Es～2.0Es之间(Es为BET水制成的内毒素标准溶液的反应终点浓度几何平均值；Et为供试品溶液制成的内毒素标准溶液的反应终点浓度几何平均值)，试验有效，说明丙泊酚注射液经12倍稀释对鲎试剂与细菌内毒素之间凝集反应既无抑制作用，也无增强现象。
2.6 丙泊酚注射液细菌内毒素检查
取3批丙泊酚注射液，使用λ=0.25 EU/mL的鲎试剂，参考《中国药典》2010年版二部附录Ⅺ E依法检查。见表4。
表4 丙泊酚注射液细菌内毒素检查结果
注：“+”表示反应为阳性，“-”表示反应为阴性
由表4可知，NC和NPC均为阴性；PPC和PC均为阳性，试验有效。结果表明，3批样品的细菌内毒素检查均符合规定。
3 讨论
干扰预试验是为了确定不出现干扰的第1个样品稀释度，初步选出对检查无干扰的样品稀释倍数范围及相应的鲎试剂灵敏度，减少后续试验的盲目性。本试验没有选以市售鲎试剂灵敏度计算所得的MVD作为起始浓度，是为了更好地探索其干扰程度，故选用原液作为起始浓度。结果显示，6倍稀释液的供试品阳性对照均部分出现阳性，12倍稀释液的供试品阳性均为阳性，因此，可确定不出现干扰的第1个样品稀释度为丙泊酚注射液的12倍稀释液。
细菌内毒素检查法具有操作简单、迅速且灵敏度高的特点。但它的试验结果会受到鲎试剂、生产工艺、处方配比、试验环境或供试品稀释方式等多种因素的影响而发生变化，不同厂家的相同品种对其细菌内毒素检查所产生的干扰情况也存在较大的差别，因此，进行干扰试验是很有必要的。
不同厂家的鲎试剂在生产工艺、抗干扰能力等方面存在差异。因此，本研究采用两个不同厂家的、灵敏度0.25 EU/mL的鲎试剂，对3批丙泊酚注射液进行试验。从干扰试验可知，稀释12倍的丙泊酚注射液溶液对细菌内毒素检查没有干扰，此方法是可行的。
[参考文献]
[1] 宋桂娥，何海霞.2种丙泊酚注射液犬体内药动学研究[J].中国药房，2010，21(13)：1168-1170.
[2] 马婕，董志.丙泊酚脑保护作用研究进展[J].国际药学研究杂志，2008，35(2)：92-95.
[3] 王恒林，王卓强，米卫东，等.丙泊酚治疗难治性癫痫持续状态的临床研究进展[J].国际药学研究杂志，2008，35(1)：23-26.
[4] 张义伟，邹冬良.丹参川芎嗪注射液细菌内毒素检查的可行性研究[J].北方药学，2010，7(6)：21-23.
[5] 黄江红，孙华芳，姚伟生，等.硫罗宁注射液细菌内毒素检查方法的建立[J].湖北中医学院学报，2010，12(2)：22-24.
[6] 莫明秀.香丹注射液中细菌内毒素的定量检测[J].广东药学院学报，2008，26(6)：608-611.
[7] 刘云，相茂花，孟蕾蕾 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(1885KB，2页)。