1.6 MYCN基因实时定量PCR检测

    用超纯RNA提取试剂盒提取组织样本中总RNA，经电泳显示28S、18S清晰两条带，用HiFi-MMLVcDNA第一链合成试剂盒进行反转录，应用实时荧光定量RT-PCR法(Roche 480Ⅱ型荧光定量PCR仪)检测瘤组织中MYCN基因mRNA表达水平，采用2-△△CT法进行数据的相对定量分析。MYCN基因上游引物序列：5’-CTCAGTACCTCCGGAGAG-3’，下游引物序列：5’-GGCATCGTIGAGGATC-3’，内参照GAPDH基因上游引物序列：5’-TGCACCACCAACTGCTTAGC-3’；下游引物序列：5’-GGCATGGACTGTGGTCATGAG-3’。实时荧光定量RT-PCR反应体系20 μL，扩增程序为：95℃ 10 min，以95℃ 15 s，60℃ 60 s循环40次。

    1.7 TUNEL法检测裸鼠肿瘤细胞凋亡

    脱氧核苷酸转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase ......