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编号:12253066
舒尼替尼对裸鼠肾癌个性化治疗的实验研究(2)
http://www.100md.com 2012年7月5日 《中国医药导报》 2012年第19期
     1.2 方法

    1.2.1 细胞培养 将肾癌786-O细胞接种于含10%胎牛血清和青、链霉素的RPMI-1640培养基中,置于二氧化碳恒温培养箱中,24 h传代1次。

    1.2.2 动物模型的建立 取对数生长期细胞,胰蛋白酶消化离心后弃上清,无血清培养液RPMI-1640洗涤2~3次,将细胞悬浮于磷酸盐缓冲液PBS中,调整细胞浓度至5×107个/mL,注射入裸鼠背部皮下,0.1 mL/只。每周一次观察肿瘤生长情况并用游标卡尺在体测量肿瘤大小,肿瘤体积计算(mm3):V=π/6×长×宽2[4]。两周左右瘤体可生长至(150±10)mm2。

    1.2.3 动物模型的检验 用活检针取肿瘤组织,HE染色下初步诊断为肾透明细胞癌。测定Renal Cell Carcinoma Marker,检测结果阳性,证实该组织为肾脏及其来源的肿瘤。

    1.2.4 VEGFR-3、PDGFα表达的测定与分组 用SP法测定VEGFR-3、PDGFRα。切片按阳性细胞着色强度与阳性细胞比例分别计分,淡黄色颗粒为1分 ......
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