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编号:12252005
乙肝携带产妇血清、乳汁及新生儿血清中HBVDNA载量的关系探讨(2)
http://www.100md.com 2012年7月25日 夏伟 陈芳
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    参见附件。

     中国属于乙型肝炎病毒(HBV)感染高流行区,一般人群的HBsAg阳性率高达9.09%。接种与未接种乙型肝炎疫苗人群的HBsAg阳性率分别达4.51%和9.51%[1]。文献报道[2],产妇 HBV感染度高达23.51%。如何阻断HBV的母婴传播是临床传染病学研究的焦点之一。目前对于乙肝携带者产后母乳喂养会否传染HBV仍存在争议[3]。血清HBV DNA是判断乙肝传染性和病毒复制最直接可靠的指标[4-6]。笔者采用荧光定量PCR技术检测乙型肝炎病毒携带产妇血清、乳汁和新生儿血清中HBV DNA含量,以探讨产妇血清不同 HBV DNA水平与乳汁和新生儿血清 HBV DNA载量之间的关系,为临床采取合适的孕期处理措施和产后母乳喂养提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 标本采集与处理

    收集2009年12月~2011年12月我院妇产科分娩的乙型病毒性肝炎病毒感染产妇293例,年龄19~43岁,平均27岁。血清标本采集:产妇空腹静脉采血2 mL、新生儿出生后24 h内(未实施被动和主动免疫)于股静脉采血2 mL,均在2 h内分离血清备用。乳汁标本采集:清洗乳房后,挤乳汁1.5~2.5 mL于消毒试管内立即送检。乳汁标本处理参考文献[7],先将标本3 000 r/min离心10 min(离心半径20 cm),弃上层脂肪层,取中层乳清进行检测。分离后的血清和乳汁标本储存于-70℃冰箱保存,同时完成检测。

    1.2 试剂、方法与仪器

    HBV DNA荧光定量检测试剂盒(中山大学达安基因股份有限公司),严格按照试剂盒说明书进行操作,检测过程实施全面质量控制。以病毒载量≥1.0×103 copies/mL判为阳性。实时荧光定量PCR扩增仪FTC-2000型(上海枫岭生物技术有限公司)。

    1.3 分组方法

    根据实验结果,将产妇血清HBV DNA载量划分为血清阴性组(HBV DNA<103 copies/mL)、血清低拷贝组(103 copies/mL

    ≤HBV DNA≤106 copies/mL)和血清高拷贝组(HBV DNA>106copies/mL)。

    1.4 统计学方法

    采用SPSS11.0统计软件,计数资料采用百分率表示,组间对比采用χ2检验。以P < 0.05为差异有统计学意义。

    2 结果

    2.1 HBV感染产妇血清HBV DNA载量

    293例HBV感染产妇中,HBV DNA阴性组、低拷贝组和高拷贝组分别占50.2%、21.8%和28.0%。见表1。

    表1 293例产妇血清中HBV DNA检测结果

    2.2 HBV感染产妇血清HBV DNA不同载量组与乳汁及新生儿血清中HBV DNA载量的关系

    血清HBV DNA阴性组产妇乳汁中HBV DNA检出率为0。而血清低拷贝组和高拷贝组产妇乳汁HBV DNA的阳性检出率分别为12.5%(8/64)和76.8%(63/82),前者明显低于后者(P < 0.01)。而血清HBV DNA阴性组、低拷贝组和高拷贝组之间新生儿血清HBV DNA阳性率分别为2.0%(3/147)、3.1%(2/64)和3.7%(3/82),三者之间差异无统计学意义(P > 0.05)。见表2。

    表2 HBV感染产妇乳汁及新生儿血清中HBV DNA检测结果[n(%)]

    3 讨论

    乙型肝炎病毒(HBV)属嗜肝DNA 病毒科(hepadnaviridae),为部分双链环状DNA。HBV DNA是乙肝病毒的遗传物质基础,是反映HBV复制及传染性的直接标志。从本研究结果看,有50.2%乙肝携带产妇血清HBV DNA阴性,49.8%为阳性,其中低拷贝组和高拷贝组HBV DNA阳性率分别为21.8%和28.0%。在147例血清HBV DNA阴性组中,产妇乳汁中HBV DNA全部阴性。在血清HBV DNA的阳性的产妇中,低拷贝组产妇乳汁HBV DNA的阳性率仅为12.5%,而高拷贝组产妇乳汁HBV DNA的阳性率高达76.8%,阳性率显著高于低拷贝组。说明产妇血清HBV DNA分泌到乳汁中可能存在一个浓度临界值(阈值),106 copies/mL很可能就是产妇血清HBV DNA分泌到乳汁的阈值浓度。血清HBV DNA达到或超过临界值浓度时,乳汁中HBV DNA阳性率大幅显著增加,而小于这个界值浓度时乳汁HBV DNA阳性率低。这与文献[8]研究结果基本一致。低拷贝组乳汁HBV DNA阳性率仍比血清 HBV DNA阴性组产妇高,两者差异有统计意义。

    因此,对于母乳喂养问题建议如下,乳汁 HBV DNA阳性的产妇,不宜哺乳喂养,而应采取人工喂养。当产妇血清和乳汁HBV DNA均阴性时可以放心实行母乳喂养,当产妇血清HBV DNA阳性浓度在103~106 copies/mL时,应检测乳汁HBV DNA浓度确定可否母乳喂养(乳汁HBV DNA阴性可进行,阳性则不可进行母乳喂养);当产妇血清 HBV DNA浓度达到或超过阈值浓度106 copies/mL时,HBV DNA容易大量进入乳汁,则不宜进行母乳喂养,而建议进行人工喂养。

    本研究结果表明,新生儿血清 HBV DNA阳性率为 2.0%~4.9%,在血清阴性组、低拷贝组和高拷贝组产妇中无差异(P > 0.05)。这说明产妇血清中HBV DNA阳性率与胎儿宫内感染率无显著相关性,与文献报道相符[9]。HBsAg阳性产妇中49.8%(146/293)具传染性,而宫内感染率才3.1%~4.9%。其原因很可能是HBV母婴垂直传播受到胎盘屏障的阻隔。换言之,胎盘屏障受损是胎儿宫内感染的一个重要因素。这一点启示我们临床医师针对HBV感染的孕妇在孕期要尽量减少药物或其他因素对胎盘屏障损伤,以减少胎儿宫内感染率。

    [参考文献]

    [1] 梁晓峰,陈园生 ......

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