松茸乙醇提取物对小鼠S180肉瘤生长的抑制作用(1)
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[摘要] 目的 探讨松茸乙醇提取物对小鼠S180肉瘤生长的抑制作用。 方法 按标准方法给小鼠接种S180肉瘤细胞，随机分组，分别灌胃给予1 000、500、250 mg/kg松茸乙醇提取物，10 d后观察肿瘤抑制率、免疫器官质量分数、体重的变化及HE染色肿瘤组织结构。结果 不同剂量松茸乙醇提取物对小鼠S180肉瘤的抑制率分别为41.82%、36.36%、8.48%；脾脏质量分数、胸腺质量分数与肿瘤模型组比较，差异均无统计学意义(均P > 0.05)。 结论 松茸乙醇提取物对小鼠S180肉瘤的生长有抑制作用。
[关键词] 松茸；S180肉瘤；肿瘤抑制
[中图分类号] R730.51 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2012)12(b)-0032-03松茸(Tricholoma matsutake)亦称松蕈、合菌、松蘑(朝鲜族)、松口蘑等，是担子菌纲伞菌目口蘑科(Tricholomataceae)口蘑属(Tricholoma)的一种与松树共生外生菌根真菌。在我国东北地区的吉林省以及西南地区的云南、四川、西藏都有分布。松茸菌肉肥厚，香气宜人，味道鲜美，具有较高的营养价值和药用价值，曾被誉为“食用菌之王”[1-3]。松茸具有很高的药用价值及多种生物活性。据文献报道，松茸具有抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗真菌、抗糖尿病、抗炎等功效[4]，在27种担子菌抗肿瘤食用菌中，其抗肿瘤活性居第2位[5]。
松茸作为一种具有显著抗肿瘤活性的食用菌，具有广阔的开发前景，据文献报道松茸中具有抗肿瘤活性的成分主要是多糖类化合物[5-7]，课题组对松茸抗肿瘤活性部位进行研究的过程中，发现醇提部位MTX也能抑制肿瘤细胞的增殖，同样具有较强的抗肿瘤活性，其活性成分及作用机制值得深入研究。
1 材料与方法
1.1材料
小鼠肉瘤S180腹水型肿瘤细胞由武汉大学基础医学院提供；环磷酰胺粉针(200 mg/支，批号：10102122)，由江苏恒瑞医药股份有限公司生产；昆明种小鼠，雄性，体重18～22 g，购自武汉大学动物中心，合格证号：4200592711。
1.2 方法[8-9]
1.2.1松茸乙醇提取物的制备 取松茸约5 kg，适当粉碎，分次置5 000 mL圆底烧瓶中，用10倍量95%乙醇回流提取3次，每次分别为3、2、2 h，纱布过滤，合并滤液，减压回收乙醇，继续浓缩，得松茸乙醇提取物浸膏约100.82 g。
1.2.2 小鼠移植瘤模型的建立 将S180小鼠腹水型肿瘤细胞株接种于腹腔，于7 d后脱颈椎处死，用75%乙醇浸泡消毒，无菌抽取腹水瘤细胞，调整细胞浓度为1.3×107/mL，将0.2 mL细胞悬液无菌皮下接种于昆明种小鼠左后肢，观察小鼠生长情况，在接种后第6天全部出现瘤块，小鼠移植瘤模型建立成功。
1.2.3 实验动物分组及给药 将小鼠随机分为5组，每组10只，即肿瘤模型组、阳性对照组及松茸乙醇提取物大、中、小剂量组。肿瘤模型组按剂量10 mL/kg灌胃给予0.5%CMC，阳性对照组按剂量50 mg/kg灌胃给予环磷酰胺，松茸乙醇提取物大、中、小剂量组以1 000、500、250 mg/kg的剂量灌胃给予松茸乙醇提取物；每日1次，连续10 d，实验过程中让小鼠自由进食和饮水，第11天停药。
1.3 观察指标
将小鼠称取体重后脱颈处死，分离肿瘤块、脾脏和胸腺组织，称取肿瘤重量，分别计算各组小鼠体重变化平均值、脾脏及胸腺质量分数、肿瘤生长抑制率。肿瘤生长抑制率=(模型组平均瘤重-给药组平均瘤重)/模型组平均瘤重×100%。各组肿瘤组织标本按照常规方法固定，包埋和切片，HE染色进行观察。
1.4 统计学方法
采用SPSS 12.0统计软件进行统计学分析。计量资料数据以均数±标准差(x±s)表示，采用方差分析，两组间比较采用t检验。以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 实验动物的生长情况
昆明小鼠接种S180后，从生长情况来看，肿瘤模型组小鼠精神状态较差，进食量显著减少，行动呆滞，皮毛无光泽。而阳性对照组及松茸乙醇提取物给药组的小鼠，其进食量及运动状态均好于肿瘤模型组，皮毛顺滑。给药前后各组小鼠体重变化见表1。由表1可见松茸乙醇提取物大、中、小剂量组及阳性对照组小鼠体重与肿瘤模型组比较，差异均无统计学意义(均P > 0.05)。
2.2 对免疫器官质量的影响
实验对动物脾脏质量分数和胸腺质量分数的影响结果见表2。由表2可知，阳性对照组与肿瘤模型组比较，差异有统计学意义(P < 0.05)，松茸乙醇提取物各剂量组与肿瘤模型组比较，差异均无统计学意义(均P > 0.05)。
2.3对小鼠S180肉瘤的生长抑制作用
松茸乙醇提取物大、中剂量组小鼠瘤重与肿瘤模型组比较显著降低，差异均有统计学意义(均P < 0.05)，且肿瘤抑制率均高于30%。松茸乙醇提取物小剂量组小鼠瘤重与肿瘤模型组比较有下降趋势，但差异无统计学意义(P > 0 ......
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