鼠胚胎干细胞定向诱导为角膜上皮细胞的实验研究
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2013年3月15日
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杨成明 滕利 黄谙飞 广东省深圳市南山区西丽人民医院眼科;广东省深圳市南山区西丽人民医院病理科;
【摘要】目的建立能够稳定表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的鼠胚胎干细胞系,并研究体外诱导鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,Es细胞)向角膜上皮细胞分化的可能性及条件,为角膜损伤提供新型的上皮修复组织来源。方法质粒pEGFP-N1脂质体复合体转染鼠胚胎干细胞,对稳定表达GFP的ES细胞以Ⅳ型胶原作为诱导条件,定向诱导鼠ES细胞向角膜上皮细胞转化,观察培养后形态改变,免疫荧光及RT-PCR检测K12、K14及CD44的表达。结果转染后ES细胞稳定表达GFP,成功诱导出角膜上皮样细胞,呈典型上皮样细胞形态,免疫组化及RT-PCR检测显示,K12及CD44表达阳性,K14表达阴性。结论转染GFP的ES细胞,在Ⅳ型胶原的诱导下,成功向角膜上皮细胞分化。
【关键词】 胚胎干细胞 绿色荧光蛋白 分化 角膜上皮细胞 诱导
【基金】广东省深圳市科技计划项目(项目编号:201003293)
【分类号】R329.2
角膜上皮位于眼角膜表面,是维持眼表正常生理功能的重要条件。健全的角膜上皮细胞是角膜抵御外界各种有害因素损伤的重要条件。人的角膜自我更新由位于角膜缘外围区域的角膜缘干细胞来维持,结构与功能健全的角膜缘干细胞是角膜上皮再生的主要来源,当角膜受到化学及热烧伤,以
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