多重耐药革兰阴性杆菌Ⅰ类整合子结构与功能分析(2)
1.3.1 实验试剂的配制
溴化乙锭(10 mg/mL)的配制方法为，精密称量溴化乙锭1 g，使用100 mL去离子水进行溶解，充分震荡直至其完全溶解，随后转入棕色容量瓶中，避光低温下保存，备用。琼脂糖凝胶的配制方法，精密称取理论量的琼脂糖，使用l×TAE缓冲液对其进行润湿，随后放入微波炉中使之融化，融化后待其冷却至60℃时，加入适量溴化乙锭溶液，充分震荡使之均匀，使制备的浓度为0.5 μg/mL。
1.3.2 药敏实验
在本次研究中，使用药敏实验对铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的耐药性进行了评价。实验方法为纸片法，主要分为K-B纸片法药敏检测实验和双纸片协同实验[7]，前者测定受试菌株的药物敏感性，后者测定菌株体内ELSBs的存在情况。
1.3.2.1 K-B纸片法 将琼脂加热融化，制备无菌琼脂培养平板，板厚约1 cm，备用。将铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌用麦氏比浊管进行浓度校正，配制0.5麦氏浊度的细菌溶液，并将多余菌群滤去，使菌液均匀。随后，于无菌操作台内使用无菌棉签沾取标准浓度的细菌溶液，以涂布的方法将细菌接种于琼脂培养平板之中。平板接种后，将其置于室温下自然干燥3～5 min ......
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溴化乙锭(10 mg/mL)的配制方法为，精密称量溴化乙锭1 g，使用100 mL去离子水进行溶解，充分震荡直至其完全溶解，随后转入棕色容量瓶中，避光低温下保存，备用。琼脂糖凝胶的配制方法，精密称取理论量的琼脂糖，使用l×TAE缓冲液对其进行润湿，随后放入微波炉中使之融化，融化后待其冷却至60℃时，加入适量溴化乙锭溶液，充分震荡使之均匀，使制备的浓度为0.5 μg/mL。
1.3.2 药敏实验
在本次研究中，使用药敏实验对铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的耐药性进行了评价。实验方法为纸片法，主要分为K-B纸片法药敏检测实验和双纸片协同实验[7]，前者测定受试菌株的药物敏感性，后者测定菌株体内ELSBs的存在情况。
1.3.2.1 K-B纸片法 将琼脂加热融化，制备无菌琼脂培养平板，板厚约1 cm，备用。将铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌用麦氏比浊管进行浓度校正，配制0.5麦氏浊度的细菌溶液，并将多余菌群滤去，使菌液均匀。随后，于无菌操作台内使用无菌棉签沾取标准浓度的细菌溶液，以涂布的方法将细菌接种于琼脂培养平板之中。平板接种后，将其置于室温下自然干燥3～5 min ......
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