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编号:12707942
Krupple样转录因子6蛋白在口腔癌组织中的表达及其与p21蛋白的关系(2)
http://www.100md.com 2014年1月25日 刘圆月 侯菊花 李灿
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    参见附件。

     1 资料与方法

    1.1 一般资料

    收集2007年9月~2012年9月入住益阳医学高等专学校附属医院的50例口腔癌组织、50例口腔癌旁组织及50例正常口腔组织作为研究对象。口腔癌患者中,男29例,女21例;年龄19~78岁,平均(50.20±11.38)岁;口腔癌旁组织均取自于本组患者;正常口腔患者中,男27例,女23例;年龄20~74岁,平均(47.09±9.39)岁。入选标准[4]:①经病理学诊断为口腔癌;②术前患者均未进行放化疗;③具有完整的临床资料等。两组患者均经医院伦理委员会批准且经患者本人知情同意入组。三组患者在性别、年龄等方面差异无统计学意义(P > 0.05),具有可比性。

    1.2 免疫组织化学染色

    所有组织均使用10%的甲醛进行固定,使用石蜡进行包埋,4 μm厚连续进行切片,组织切片常规烤片、脱蜡、微波抗原修复以及清除内源性过氧化物酶、DAB显色,苏木精衬染;使用已知阳性切片作为阳性对照,使用磷酸盐缓冲液(PBS)来代替一抗作阴性对照。染色方法具体参考说明书进行操作[5]。

    1.3 结果判定标准

    KLF6阳性标记部位在细胞核和细胞浆;p21阳性标记部位主要在细胞核。采用双盲法由2名经验丰富且不知道临床资料的临床病理专家分别独立作出判断:400倍视野随机计数4个不同视野的阳性细胞数和细胞总数,计算阳性细胞占细胞总数的比值。参照Fromowit等的方法在高倍镜下对着色反应作评分:a.无着色为0分,淡黄色为1分,棕黄色为2分,棕褐色为3分;b.阳性范围:无着色为0分,>0%~10%为1分,>10%~50%为2分,>50%~80%为3分;>80%~100%为4分,两项结果相乘 ......

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