提高Lipofectamine2000对PC12细胞转染效率的研究(2)
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[Key words] PC-12 cells； Lipofectamine2000； Cationic liposome/DNA compound； Chloroquine； Spermidine
PC12细胞诱导产生的神经轴突能作为研究神经退行性疾病及脊柱损伤的研究模型[1-2]，也是研究神经内分泌试验的模型[3]。细胞转染技术是分子生物学及基因工程关键步骤之一[4]，也是体外研究神经细胞特定基因表达调控及遗传病基因治疗的重要技术之一[5]，但常用的阳离子脂质体转染试剂对PC12细胞转染效率低[1，6-8]。本研究参照相关文献[8-10]，通过在阳离子脂质体转染过程中加入氯喹及亚精胺，同时调整阳离子脂质体转染试剂与DNA用量的比例和转染时间，实现提高PC12细胞转染率，且未影响细胞的正常功能，为PC12细胞进行神经细胞基因功能及开发遗传病治疗方案等生物学研究提供了一种安全、廉价的新方法。
1 材料与方法
1.1 试剂与仪器
主要试剂：PC12细胞(American Culture Collection)，RPMI1640培养基(Sigma公司)，Lipofectamine2000(Invitrogen公司)，FuGENE HD(Roche公司)，PolyJet(Signagen Laboratoies公司)，Lipofectamine LTX and Plus(Invitrogen公司)，pEGFP-N1(BD Biosciences公司) ......
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