生存素下调多药耐药蛋白增强人鼻咽癌细胞株对紫杉醇敏感性的研究(1)
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杨 宁1 朱乐攀2 谭 潭2 侯春燕1
1.湖南省郴州市第一人民医院耳鼻喉科，湖南郴州 423000；
2.湖南省郴州市第一人民医院检验科，湖南郴州 423000
[摘要] 目的 研究生存素(Survivin)下调多药耐药蛋白(MRP)的表达与鼻咽癌紫杉醇(PTX)耐药性关系，探讨鼻咽癌PTX耐药的分子机制。 方法 采用免疫组化检测Survivin和MRP在42例鼻咽癌PTX耐药患者与24例PTX非耐药患者中的表达；采用浓度递增法持续诱导建立鼻咽癌化疗耐药细胞株5-8F-PTX(+)，绘制细胞生长曲线，测定细胞生长的倍增时间，检测肿瘤细胞的周期分布；采用siRNA技术干扰5-8F-PTX(+)中Survivin的表达后，Western blot法检测Survivin和MRP表达变化，MTT检测不同抗肿瘤药物PTX、顺铂(cDDP)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、长春新碱(VCR)耐药敏感性的变化。 结果 Survivin在鼻咽癌化疗耐药患者中阳性表达率为83.3%，明显高于非耐药患者(41.7%)，差异有高度统计学意义(P < 0.01)；MRP在鼻咽癌PTX耐药患者中表达阳性率为88.1%，明显高于非耐药患者(37.5%)，差异有高度统计学意义(P < 0.01)。5-8F-PTX(+)较5-8F的细胞生长速度明显减慢，5-8F-PTX(+)细胞生长的倍增时间为21 h，亲本5-8F细胞生长的倍增时间为15 h；5-8F-PTX(+)的G2/M期细胞百分比[(23.1±1.3)%]显著高于亲本5-8F细胞[(13 ......
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杨宁 朱乐攀 谭潭 侯春燕 湖南省郴州市第一人民医院耳鼻喉科;湖南省郴州市第一人民医院检验科;
【摘要】目的研究生存素(Survivin)下调多药耐药蛋白(MRP)的表达与鼻咽癌紫杉醇(PTX)耐药性关系,探讨鼻咽癌PTX耐药的分子机制。方法采用免疫组化检测Survivin和MRP在42例鼻咽癌PTX耐药患者与24例PTX非耐药患者中的表达;采用浓度递增法持续诱导建立鼻咽癌化疗耐药细胞株5-8F-PTX(+),绘制细胞生长曲线,测定细胞生长的倍增时间,检测肿瘤细胞的周期分布;采用siRNA技术干扰5-8F-PTX(+)中Survivin的表达后,Western blot法检测Survivin和MRP表达变化,MTT检测不同抗肿瘤药物PTX、顺铂(cDDP)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、长春新碱(VCR)耐药敏感性的变化。结果 Survivin在鼻咽癌化疗耐药患者中阳性表达率为83.3%,明显高于非耐药患者(41.7%),差异有高度统计学意义(P0.01);MRP在鼻咽癌PTX耐药患者中表达阳性率为88.1%,明显高于非耐药患者(37.5%),差异有高度统计学意义(P0.01)。5-8F-PTX(+)较5-8F的细胞生长速度明显减慢,5-8F-PTX(+)细胞生长的倍增时间为21 h,亲本5-8F细胞生长的倍增时间为15 h;5-8F-PTX(+)的G2/M期细胞百分比[(23.1±1.3)%]显著高于亲本5-8F细胞[(13.5±0.9)%];Survivin和MRP在PTX耐药细胞株5-8F-PTX(+)细胞株中的表达水平明显高于非耐药的5-8F,siRNA干扰5-8F-PTX(+)中Survivin的表达后,Survivin和MRP表达明显下调,PTX、cDDP、5-FU、VCR耐在siRNA-5-8F-PTX(+)中的IC50值不同程度地下降。结论 Survivin可通过下调MRP的表达增强鼻咽癌细胞对PTX的敏感性。
【关键词】 鼻咽癌 紫杉醇 耐药性 生存素 多药耐药相关蛋白
【基金】湖南省卫生厅科研计划课题项目(编号B2010-27)
【分类号】R739.63
鼻咽癌(NPC)是头颈部肿瘤中常见的恶性肿瘤,在中国南方其发病率居世界首位[1]。临床上,鼻咽癌确诊时往往已经到了晚期,其临床治疗方式是放疗和化疗相结合的方法,其临床疗效比较差,其5年无病生存率小于60%,化疗耐药的产生是鼻咽癌化疗失败的主要原因之一[2]。紫杉醇(PTX)是临
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