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编号:12707627
大鼠肝细胞癌变过程中survivin与livin的动态表达及相关性研究(2)
http://www.100md.com 2014年3月15日 李丰 王炜 姜开文 等
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    参见附件。

     [Key words] Rat; Hepatocellular carcinoma; Survivin; Livin

    肝细胞癌(HCC)是临床中常见的肿瘤,大部分进展期的病例缺乏有效的临床治疗,日益受到重视[1]。无限的细胞增殖和损伤凋亡的不平衡是HCC重要的特征[2]。IAP家族是重要的凋亡抑制因子。目前已发现8种IAPs,作为家族的新成员,survivin被认为在肿瘤的发生、发展中扮演重要角色;livin的研究则刚刚开始,其在肝肿瘤组织中的表达研究更不完善,在我国鲜有livin在肝癌组织中的研究报道。本文用免疫组化、Western bolt、RT-PCR法检测抗凋亡蛋白livin、survivin蛋白和mRNA在肝癌组织中的表达,探讨二者之间相互关系,从而为临床诊断和肝癌的治疗提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物及建模 健康清洁级雄性SD大鼠100只(190~200 g),购自中山大学医学院动物中心,饲养于普通级实验室,标准饲料喂养。随机分为模型组、对照组,各50只。模型组大鼠0.01%DEN(饮用蒸馏水配制,Sigma公司产品,纯度为99.9%)自由饮水18周[3]建立大鼠肝癌模型。对照组大鼠常规自由饮水。分别在4、8、12、16、18周处死模型组、对照组大鼠各10只。取左肝迅速进行液氮冷冻后放入-80℃冰箱以备行Western bolt、RT-PCR检测,右肝进行固定、脱水透明、常规包埋,行免疫组织化学检测。

    1.1.2 试剂 兔抗鼠livin抗体购自Sigma公司;兔抗鼠survivin抗体购自Abcam公司;Trizol购自Invitrogen公司;即用型SP试剂盒、DAB购自福建迈新生物制剂有限公司 ......

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