青蒿组分的体外抗氧化活性研究(2)
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1 材料与方法
1.1 仪器与材料
1.1.1 仪器
RE-5205/RE-52A旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);TDL-5-B型台式低速离心机(湖南星科科学仪器有限公司);电热真空干燥箱(天津市天宇实验仪器有限公司);BP121S万分之一天平(德国赛托利斯公司);XW-80A微型漩涡混合仪(上海沪西仪器厂有限公司);KQ-250E型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);MODEL2-16A高速离心机(TOMOS);202-0型台式干燥箱(北京市永光明医疗仪器厂);多功能微孔板分析仪(美国Molecular Devices 公司)。
1.1.2 试剂与药材
1.1.2.1 试剂D101型大孔吸附树脂(天津市海光化工有限公司);甲醇,乙腈为色谱纯(天津康科德有限公司);芦丁,没食子酸(中国药品生物制品检定所);DPPH(Sigma-aldrich);甲酸(TEDIA Company,USA)水为超纯水(Millipone),其余试剂均为分析纯。
1.1.2.2 药材青蒿(江苏康源股份有限公司青蒿基地)。
1.2 实验方法
1.2.1 青蒿组分的制备
称取青蒿饮片0.5 kg,置于10 L圆底烧瓶中,加6 L蒸馏水,浸泡12 h,加热回流2 h,滤过,剩余残渣加入4 L蒸馏水,加热回流2 h,滤过,合并滤液,60℃减压浓缩至700 mL,取50 mL母液作为S1,剩余母液70%醇沉,静置12 h。醇沉溶液14 000 r/min,离心10 min,得沉淀S2和上清液,上清液于60℃减压浓缩至400 mL,取50 mL作为S3。剩余溶液用等体积石油醚萃取,得石油醚萃取物S4,取剩余溶液50 mL作为S5,然后剩余溶液用等体积乙酸乙酯萃取,得乙酸乙酯萃取物S6,取剩余溶液50 mL作为S6。过D101大孔树脂,分别用两个柱体积的蒸馏水 ......
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