特异性基因沉默对Machado—Joseph病ATXN3变异表达的抑制作用
http://www.100md.com
2014年8月25日
 |
| 第1页 |
参见附件。
欧阳嶷 何志义 刘嘉晖 朱华倩 中国医科大学附属第一医院神经内科;
【摘要】目的利用RNAi技术,观察不同siRNA在体外对Machado-Joseph病变异基因表达的抑制作用,为其应用于临床打下基础。方法本研究分为变异型ATXN3组、野生型ATXN3组及空病毒载体组(对照组)。通过设计针对ATXN3变异基因的特异性siRNA,构建重组型慢病毒载体转染HEK293T细胞,采用Real-time PCR及Western blot检测ATXN3 mRNA和蛋白的表达水平,从而对siRNA体外抑制Machado-Joseph病变异基因的效果进行评估。结果 Real-time PCR分析表明,在共转染表达人变异型ATXN3基因和siRNA ATXN3 Mut载体的细胞中,变异型ATXN3组中ATXN3 mRNA的表达较对照组明显下降,差异有统计学意义(P0.05),而野生型ATXN3组中ATXN3 mRNA的表达较对照组仅轻微下降,差异无统计学意义(P0.05)。Western blot结果表明,与对照组比较,变异型ATXN3组ATXN3蛋白表达被siRNA ATXN3 Mut 1~4明显抑制,差异有统计学意义(P0.05),野生型ATXN3组中ATXN3蛋白表达仅被siRNA ATXN3 Mut 1~4轻度抑制。结论特异性siRNA可以选择性沉默变异型ATXN3,说明RNAi是Machado-Joseph病治疗的潜在方向。
【关键词】 Machado-Joseph病 基因沉默 RNA干扰 小干扰RNA 慢病毒载体
【基金】国家自然科学基金资助项目(编号81100879) 辽宁省博士科研启动基金资助项目(编号20101140)
【分类号】R744.7
Machado-Joseph病,又称为脊髓小脑共济失调3型(SCA3),其临床特征为小脑性共济失调伴有不同程度的锥体束征、锥体外系征、眼外肌麻痹及周围神经病等[1]。该疾病是最常见的一种常染色体显性遗传性脊髓小脑共济失调,其罹患率高达脊髓小脑共济失调的40%~50%[2]。和许多神经系统遗
------
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(3675kb)。