食管鳞状细胞癌组织中ADAMTS18基因的表达及临床意义(2)

http://www.100md.com 2015年2月5日 中国医药导报2015年第4期

     1.2.2 免疫组织化学S-P法(生物素-链霉卵白素过氧化酶系统)检测ADAMTS18蛋白在ESCC组织中的表达 石蜡标本常规4 μm连续切片，进行免疫组织化学染色的切片经脱蜡、水化后，采用3%甲醇过氧化氢灭活内源性过氧化物酶，EDTA缓冲液高压锅抗原热修复。一抗为兔抗人ADAMTS18多克隆抗体，加SP试剂后DAB显色，苏木精复染细胞核，常规脱水、透明、中性树胶封片。PBS代替一抗作为阴性对照，用已知平滑肌纤维组织阳性切片作为阳性对照。根据半定量标准：物镜下阳性细胞≤10%判为1分；>10%～50%判为2分；>50%～75%判为3分；>75%判为4分。染色强度分数判断标准：无色判为0分；淡黄色判为1分；棕黄色判为2分；棕褐色判为3分。将上述两项得分相加：0分表示为“-”，1～2分表示为“+”，3～4分表示为“++”，5～6分表示为“+++”。以“++”或“+++”时定义为阳性表达，以“-”或“+”时定义为阴性表达。免疫组化染色结果经两名有经验的病理学医师采用双盲法诊断，一张切片需观察至少5个高倍视野。

    1.3 统计学方法

    采用SPSS 13.0统计学软件进行数据分析，计量资料数据用均数±标准差(x±s)表示，两组间比较采用t检验；计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。

    2 结果

    2.1 ESCC组织中ADAMTS18 mRNA的表达

    ADAMTS18 mRNA在ESCC组织中的相对表达量为(0.361±0.115) ......