TWS119对结肠癌LOVO细胞系增殖能力和耐药性的影响(2)
1 材料与方法
1.1 细胞培养和药物处理
LOVO细胞系(中山大学实验动物中心提供)分为2 μmol/L TWS119处理组、1 μmol/L TWS119处理组和阴性对照组。在含10%胎牛血清、100 μg/mL链霉素和100 U/mL青霉素的RPMI1640培养基(Gibco)，5%CO2、37℃无菌培养箱中培养，TWS119(Selleck)溶于DMSO中-20℃避光保存，处理组分别加入2、1 μmol/L TWS119[13]，阴性对照组加入等体积DMSO，培养24 h后进行后续实验。
1.2 qRT-PCR
收集细胞，用trizol试剂(invitrogen)提取细胞总RNA，用两步法qRT-PCR SYBER试剂盒(TAKARA)检测各组细胞MRP1、P-gp mRNA表达，各引物设3个复孔，引物序列(由Invitrogen公司合成)见表1。
1.3 Western blot
收集细胞 ......
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1.1 细胞培养和药物处理
LOVO细胞系(中山大学实验动物中心提供)分为2 μmol/L TWS119处理组、1 μmol/L TWS119处理组和阴性对照组。在含10%胎牛血清、100 μg/mL链霉素和100 U/mL青霉素的RPMI1640培养基(Gibco)，5%CO2、37℃无菌培养箱中培养，TWS119(Selleck)溶于DMSO中-20℃避光保存，处理组分别加入2、1 μmol/L TWS119[13]，阴性对照组加入等体积DMSO，培养24 h后进行后续实验。
1.2 qRT-PCR
收集细胞，用trizol试剂(invitrogen)提取细胞总RNA，用两步法qRT-PCR SYBER试剂盒(TAKARA)检测各组细胞MRP1、P-gp mRNA表达，各引物设3个复孔，引物序列(由Invitrogen公司合成)见表1。
1.3 Western blot
收集细胞 ......
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