红花籽粕降糖有效部位的纯化工艺(2)
2.2.3 α-葡萄糖苷酶的抑制活力检测 将文献[19]的方法进行改进测定解吸附的样品对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。α-葡萄糖苷酶筛选方法:0.1 mol/L磷酸缓冲液(0.1 mol/L K2HPO4,0.1 mol/L KH2PO4,H2O)68.5 μL,在96孔板中加入α-葡萄糖苷酶溶液1.5 μL,测试样品或阳性对照样品5 μL(将样品配成浓度梯度)或DMSO 5 μL,混匀后室温反应10 min,再加入20 mmol/L底物4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)25 μL,37℃恒温反应20 min后终止反应。以不含酶溶液的系统为空白,利用SpectraMax MD5酶标仪(美国Molecular Devices)测定405 nm处的吸收值。
抑制率=(OD405空白-OD405样品)/OD405空白×100%。
2.2.4 检测结果 通过分析11种大孔树脂对红花籽粕样品吸附、解吸能力及样品对PTP1B酶和α-葡萄糖苷酶抑制能力,由表1可以看出,HPD500、HPD600、HPD750、AB-8、X-5、NKA-9-17、D101型号树脂对红花籽粕提取液有较强的吸附效果 ......
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抑制率=(OD405空白-OD405样品)/OD405空白×100%。
2.2.4 检测结果 通过分析11种大孔树脂对红花籽粕样品吸附、解吸能力及样品对PTP1B酶和α-葡萄糖苷酶抑制能力,由表1可以看出,HPD500、HPD600、HPD750、AB-8、X-5、NKA-9-17、D101型号树脂对红花籽粕提取液有较强的吸附效果 ......
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