延灵丹方对卵巢早衰小鼠激素水平及凋亡调控蛋白Bcl—2/Bax表达的影响(2)

http://www.100md.com 2016年7月25日 《中国医药导报》2016年第21期

     1.6.3 Western blot检测卵巢中Bcl-2、Bax蛋白表达 取每组小鼠卵巢组织20 g，冰上提取蛋白。BCA法测定蛋白浓度后确定蛋白上样量，进行SDS-PAGE凝胶电泳后，转至PVDF膜，以3%脱脂奶粉封闭1 h，再分别添加兔抗小鼠Bcl-2抗体(1∶500)，兔抗小鼠Bax抗体(1∶100)和兔抗小鼠β-actin抗体(1∶300)，37℃孵育2 h，洗膜后，加HRP标记的山羊抗兔IgG(1∶500)，37℃孵育1 h。2 h后用超敏发光液显影、定影，Image-Pro Plus6.0.1软件测定各组蛋白条带吸光度值，以β-actin作为内参照，将各组条带与β-actin的比值作为蛋白表达水平。

    1.7 统计学方法

    采用SPSS 19.0统计软件对本实验数据进行分析，计量资料以均数±标准差(x±s)表示，多组比较采用单因素方差分析，组间比较用SNK-q检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。

    2 结果

    2.1 各组小鼠卵巢大体解剖及染色光镜下组织形态观察

    大体观察小鼠卵巢组织 ......