叉头框C2蛋白在肾细胞癌组织中的表达及临床意义(2)
1.2 方法
1.2.1 qRT-PCR 抽提总RNA，反转录为cDNA，以各组cDNA为模板，进行qRT-PCR。FOXC2上游引物：5'-GCAGTTACTGGACCCTGGAC-3'，下游引物：5'-CTTCTTCTCGGCCTCCTTGG-3'；内参GAPDH上游引物：5'-CGGAGTCAACGGATTTGGTCGTAT-3'，下游引物：5'-AGCCTTCTCCATGGTGGTGAAGAC-3'。反应体系：模板2 μL，2×SYBR Premix Ex TaqTM Ⅱ 10 μL，引物0.8 μL+0.8 μL，ddH2O 6.4 μL。反应条件：95℃预变性5 min，95℃变性15 s，60℃退火延伸30 s，72℃后延伸7 min，共40个循环。使用2-ΔΔCt分析法进行数据分析。实验独立重复3次。
1.2.2 免疫组织化学染色 所有石蜡标本60℃烘烤2 h，采用EnVision二步法进行免疫组化染色 ......
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1.2.1 qRT-PCR 抽提总RNA，反转录为cDNA，以各组cDNA为模板，进行qRT-PCR。FOXC2上游引物：5'-GCAGTTACTGGACCCTGGAC-3'，下游引物：5'-CTTCTTCTCGGCCTCCTTGG-3'；内参GAPDH上游引物：5'-CGGAGTCAACGGATTTGGTCGTAT-3'，下游引物：5'-AGCCTTCTCCATGGTGGTGAAGAC-3'。反应体系：模板2 μL，2×SYBR Premix Ex TaqTM Ⅱ 10 μL，引物0.8 μL+0.8 μL，ddH2O 6.4 μL。反应条件：95℃预变性5 min，95℃变性15 s，60℃退火延伸30 s，72℃后延伸7 min，共40个循环。使用2-ΔΔCt分析法进行数据分析。实验独立重复3次。
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