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编号:12986668
土槿皮乙酸抗人宫颈癌Siha细胞及其机制研究(2)
http://www.100md.com 2016年11月5日 《中国医药导报》 2016年第31期
     1.2 实验方法

    1.2.1 细胞培养 人宫颈鳞癌Siha细胞购于中国典型培养物保藏中心,培养于RPMI1640培养基(含10%胎牛血清、青霉素100 U/mL和链霉素100 μg/mL),于5%CO2、37℃恒温培养箱中培养。

    1.2.2 细胞增殖抑制率检测 Siha细胞以5×103/孔种于96孔板,24 h后更换含不同浓度PAB的培养基100 μL。药物浓度分别为0、1、2、4、8、16 μmol/L,每个浓度设6个副孔,分别于24、48、72 h更换CCK-8检测试剂100 μL(90 μL RMPI1640培养基+10 μL CCK-8液),于5%CO2、37℃恒温培养箱中孵育4 h,用酶标仪在450 nm波长检测各孔的吸光度值(A)。实验重复3次。计算细胞增殖抑制率:抑制率(%)=(1-实验组平均A值/对照组平均A值)×100%。

    1.2.3 免疫印迹实验 A2780细胞以2×105/孔种于6孔板,24 h后更换含不同浓度PAB的培养基1.5 mL ......
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