1.2 细胞培养

    使用含10%FBS的RPMl l640培养基，在37℃、10%(体积分数)CO2的温箱中培养肝癌细胞株HepG2细胞。在相同条件下，使用含有10%FBS的DMEM培养基培养正常肝细胞LO2。EHHM和超纯水依据体积比分别制成培养HepG2和LO2培养的培养基。

    1.3 MTT法检测EHHM对HepG2细胞生长能力的影响

    先饥饿培养HepG2和LO2细胞24 h后，用含胰酶消化处理计数，然后在96孔培养板中每孔加入150 μL(含有3.5×103个/mL细胞)含10%FBS的RPMI1640培养基的细胞悬液，分别加入最终浓度0.1、1.0、5.0 μg/mL的含EHHM的培养液，加入等体积超纯水培养液为对照，放置于37℃、10%(体积分数)CO2培养箱中培养24、48、72 h后。弃上清液，每孔加入20 μL MTT溶液继续培养4 h，吸除培养液，每孔再加入100 μL DMSO，震荡均匀后，选择490 nm波长，测定每个培养孔的光密度值(OD)。其抑制率或者增殖率的计算公式如下[7]：

    肿瘤细胞生长抑制率% =(1-实验组平均OD值/对照组平均OD值)×100% ......