1.3.2 获取脑组织 断头处死大鼠，于冰台上迅速剥取出脑组织，分离出额叶及海马组织，迅速置入冻存管中并于液氮中冻存。

    1.3.3 半定量RT-PCR法 RNA 抽提：取约100 mg组织放于研磨器内，边研磨边加入液氮，将组织研磨成粉末状，加入含有Trizol溶液的EP管中，在超声破碎仪中给予充分混匀，置于冰上10 min。加入氯仿，用力充分混匀，置于冰上10 min。离心15 min，10 000 r/min。等体积异丙醇与上层水相混匀后置于-20℃冰箱中10 min，待能看见清楚分层后，离心10 min，10 000 r/min。留取白色沉淀，振荡洗涤RNA，离心5 min，12 000 r/min。弃上清液，4℃冰箱内适度干燥RNA。通过检测波长260 nm和280 nm的吸光度(OD)值，部分RNA进行完整性电泳。

    AMV一步法RT-PCR检测：以总RNA为模板逆转录得到cDNA。根据Primer 5.0软件设计AK2引物序列，并已通过碱基局部对准检索工具检测：上游引物5′-GAAGGGGTTAGGGAACAAGC-3，下游引物5′-ATGGCAGCATTTGGTCAGTT-3′。β-actin 上游引物5′-AGATGACCCAGATCATGTTTGA-3′ ......