鉴于以上原因，本研究设计了以下实验：研究分析人鳞状细胞癌株Hep-2细胞X线照射后细胞增殖、凋亡和周期的变化以及细胞中SHIP2的表达情况，从而证实SHIP2是否与喉癌细胞的增殖、生长有关，为临床上研究喉癌患者放射敏感性的个体化及预测其预后提供新途径。

    1 材料与方法

    1.1 细胞株及培养条件

    人鳞状细胞癌株Hep-2细胞购于武汉大学细胞典藏中心。细胞培养条件：含10%胎牛血清的DEME培养基，37°C、5%CO2培养箱中培养。

    1.2 试剂与仪器

    1.2.1 试剂 DEME高糖培养基、胰蛋白酶购自美国Hyclone公司；青霉素-链霉素双抗溶液、PBS缓冲液购自GIBCO公司；胎牛血清购自杭州四季青公司；羊抗SHIP2抗体购自Santa Cruz公司；小鼠抗β-actin抗体、辣根过氧化物(HRP)标记的兔抗羊抗体购自武汉博士德生物公司；RNA提取试剂TRIzol及二甲基亚砜(DMSO)购自Invitrogen公司；RNA逆转录试剂盒、PCR反应试剂盒、细胞增殖活性检测试剂盒CCK-8均购自江苏碧云天公司；细胞凋亡检测试剂盒Annexin V-FITC/PI apoptosis kit及细胞周期染色试剂盒cell cycle stain kit均购自杭州联科科技有限公司；十二烷基磺酸钠聚丙酰胺(SDS-PAGE)凝胶制备试剂盒、RIPA总蛋白裂解液、BCA蛋白质浓度测定试剂盒、ECL化学发光检测试剂盒、蛋白酶抑制剂混合物均购自ASPEN公司 ......