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编号:13230594
扶正抑瘤汤对肝癌细胞侵袭转移能力影响的研究(2)
http://www.100md.com 2018年4月5日 《中国医药导报》 2018年第10期
     1.3 药物处理

    以5×106/L的密度分别将HepG2、MHC97-H接种于75 mL细胞培养瓶中,每瓶6 mL。细胞贴壁后,分别加入新鲜配制的扶正抑瘤汤和PBS。为观察肿瘤细胞对药物的剂量依赖性,以终浓度为50、100、200、400 mg/mL的扶正抑瘤汤作用细胞,培养72 h时更换培养液及药物。

    1.4 细胞增殖检测

    对数生长期细胞,调整细胞密度为103~104个/mL,接种于96孔板中,每孔100 μL,置于CO2培养箱中培养24 h,细胞贴壁后按照分组加入含药培养基,设置4个浓度(50、100、200、400 mg/mL)和对照组(只加培养液),每组设置4个复孔。置培养箱继续培养24、48、72 h后,每孔吸去20 μL上清,加20 μL MTT,在培养箱中温育4 h后,吸净上清,每孔加150 μL DMSO,震荡10 min,用酶标仪在490 nm波长处检测吸光度A值。

    1.5 划痕实验

    在6孔板背侧横穿过孔均匀划5条横线。将经400 mg/mL扶正抑瘤汤处理96 h后的MHC97-H细胞以5×105个/孔的密度接种6孔板,继续培养12 h使之贴壁,换无血清培养基饥饿12 h ......
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