1 材料与方法

    1.1 主要试剂

    结核分枝杆菌强毒株H37Rv(美国ATCC公司)；HEK293细胞(中国科学院上海细胞库)；miR-221模拟物、抑制物(上海吉玛生物制药技术有限公司)；酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒(上海BlueGene公司)。

    1.2 细菌制备

    细菌初次传代后培养6～7 d[8]，收集菌液，制成单细菌悬液，再调整浓度至4×107个/mL。

    1.3 细胞分离和培养

    巨噬细胞分离自健康人的外周血(陕西省汉中市中心医院检验科采集)，方法如文献[9]所述。取健康人的静脉血，将血液离心得到单核细胞。洗涤去除血小板后，用含20%人血清白蛋白的RPMI 1640培养基于37℃、5%CO2的培养箱中培养，2～3 d换1次液，7～10 d后即可自然分化成巨噬细胞。

    1.4 细胞转染

    取对数生长期的巨噬细胞，用LipofectamineTM 2000转染miR-221模拟物、miR-221抑制物以及相应的阴性对照 ......