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编号:13276580
CD47抗体对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌细胞损伤的保护作用(3)
http://www.100md.com 2018年9月15日 《中国医药导报》 2018年第26期
     1.5.3 LDH、CK、SOD、MDA和NO水平检测 收集各组细胞上清液,按照试剂盒说明书操作,使用酶标仪检测LDH、CK、SOD、MDA和NO水平。

    1.5.4 活性氧(ROS)检测 细胞使用DPBS洗涤3次;加入DHE(10 μm),37℃避光孵育30 min;DPBS洗涤3次后荧光显微镜拍照。

    1.5.5 Western blot 采用蛋白提取试剂盒提取细胞蛋白,使用BCA蛋白测定试剂盒进行蛋白定量,10% SDS-聚丙烯酰胺凝胶进行电泳分离、转膜。5%脱脂奶粉TBST溶液室温封闭3 h后,分别加入Anti-CD47抗体、Anti-Bax抗体、Anti-Bcl-2抗体和Anti-GAPDH抗体。4℃孵育过夜,1×TBST洗3次,加入辣根过氧化酶标记的二抗,室温孵育2 h,1×TBST洗3次,增强化学发光法显色,凝胶成像系统拍照。使用Image J软件定量,使用GraphPad Prism软件作图。

    1.6 统计学方法

    采用SPSS 17.0对所得数据进行统计学分析,计量资料以均数±标准差(x±s)表示,多组间比较采用方差分析,组间两两比较采用LSD检验 ......
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