不同中药制剂微生物限度检查方法学的研究(2)
2 方法与结果2.1 菌液制备
接种大肠埃希菌、乙型副伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌至10 mL胰酪大豆胨液体培养基中30~35℃培养24 h;接种白色念珠菌至10 mL沙氏葡萄糖液体培养基中20~25℃培养48 h;接种黑曲霉至沙氏葡萄糖琼脂斜面培养基上20~25℃培养7 d,再用5 mL含0.05%(mL/mL)聚山梨酯80的pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液(稀释剂)将孢子洗脱,并过滤孢子至无菌试管内。取上述各培养物1 mL,用稀释剂10倍递增稀释,分别制成3000~10 000 cfu/mL的菌悬液(1 mL/皿)和15 000~50 000 cfu/mL的菌悬液(0.2 mL/皿)。
2.2 供试液的制备
2.2.1 计数用供试液制备
取供试品10 g或10 mL,加45℃稀释剂至100 mL,研匀。
2.2.2 耐胆盐革兰阴性菌检查供试液制备
取供试品10 g ......
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