2.7.5 加样回收率 取6份同一批已知含量的三叶青叶粉末(福州闽侯)0.5 g，精密称定，精密加入“2.1”项下的混合对照品母液1～3 mL，按“2.2.1”项下方法制备供试品溶液，依法测定，计算回收率。结果见表3。异荭草素、荭草素、牡荊素鼠李糖苷、牡荆素、异牡荆素的平均回收率分别为103.0%、103.9%、97.5%、101.0%、97.4%，RSD分别为1.28%、1.67%、1.73%、2.75%、2.79%。表明该方法准确度良好。

    2.9.6 样品含量测定 将8份三叶青叶按“2.2.1”项下方法制备供试品溶液，依法测定。各产地样品色谱图见图4，结果见表4。结果表明不同产地叶子中各碳苷黄酮含量与组成都有很大差别，其中广西天峨样品中5个成分均未检出，但未知强峰通过DAD光谱分析具有同牡荆素类黄酮相同的光谱特征。

    3 讨论

    文献报道三叶青中含有各类黄酮[22-23]，测定总黄酮的报道较多[24-26]。笔者取三叶青根粉、藤与叶采用HPLC测定11种黄酮(白藜芦醇、槲皮素、山萘酚、白皮杉醇、香橙素、芦丁、虎杖苷、异槲皮苷、根皮苷、芸香糖苷、紫云英苷)，只检出叶中有极少量的异槲皮素和芦丁；通过HPLC法的光谱扫描发现三叶青叶提取物中有2组相似的未知黄酮类成分；通过UPLC-MS/MS分析鉴定及HPLC对照实验证实这些信号极强的黄酮为异荭草素鼠李糖苷、异荭草素、荭草素 ......