1 材料与方法

    1.1 大鼠尾成纤维细胞制备及培养

    利用组织干涸法提取SD大鼠(200～250 g)尾成纤维细胞，所有实验用细胞均来自同一只大鼠，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号：SCXK(京)2011-0011，利用成纤维细胞特异性抗原DDR2和Vimentin鉴定。所得的成纤维细胞置于含有10%胎牛血清、100 U/mL的青霉素和链霉素的DMEM/F12培养基中培养(5%CO2、37℃)，每周换液2次。当汇合度达90%时传代。

    1.2 直接重编程及分组

    传至第3代，利用携带GATA-4、Mef2c、Tbx5三种因子的Lipofectamine 2000转染系统体外直接重编程成纤维细胞。重编程后将细胞随机分为未处理组(在培养基中加入与bFGF组等量溶剂)及bFGF处理组(在培养基中加入50 μg/L bFGF)。

    1.3 蛋白表达测定

    采用Western blot技术测定心肌细胞特异性肌钙蛋白T(cTNT)、α-肌球蛋白重链(α-MHC)、GATA结合蛋白4抗体(GATA-4)和连接蛋白43(CX43)的蛋白表达 ......