天力克注射液诱导HepG-2肝癌细胞自噬及对端粒酶活性的影响
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摘 要：目的：研究复方虫草制剂-天力克注射液对人肝癌细胞HepG-2抗肿瘤作用的分子机制及其对端粒酶活性的影响。方法：用透射电镜观察超微结构的变化；Hoechst33258荧光染色观察细胞核形态的变化；应用流式细胞仪(FCM)PI染色检测细胞周期变化及bcl-2的变化，AV/PI双染检测细胞膜的改变；免疫组化方法测定Survivin蛋白及NF-κBp65的表达；用TRAP-PCR-银染法对肝癌细胞端粒酶活性进行检测。结果：Hoechst33258荧光染色显示天力克使细胞核轻微浓缩；免疫组化显示天力克使Survivin蛋白及NF-κBp65的表达下调(P<0.0005)；FCM检测结果显示天力克作用后，S期细胞比例增高，G0/G1期及G2/M期细胞比例下降(P<0.0005)，并使bcl-2表达下降；Annexin-V/PI染色后流式细胞仪检测，天力克组出现明显磷脂酰丝氨酸(phosphatdylserine，PS)膜外翻；TRAP-PCR-银染法显示天力克使端粒酶活性下调(P<0.01)。结论：天力克对人肝癌细胞的作用主要是细胞自噬，导致细胞浆空泡变性，胞浆内容物降解，轻度的染色质浓缩；明显改变细胞周期，阻滞细胞于S期，细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻，膜结构发生改变；其诱导细胞自噬作用机制主要与抑制端粒酶活性、下调Survivin蛋白、NF-κB p65及bcl-2的表达有关 ......
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