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编号:11751268
沙棘对小鼠免疫功能作用的研究
http://www.100md.com 2009年1月1日 《亚太传统医药》 2009年第1期
沙棘对小鼠免疫功能作用的研究

     (1.滨州医学院,山东 滨洲256603;2.烟台市警备区第二干休所,山东 烟台 264000)

    摘 要:目的:观察沙棘对小鼠抗体形成细胞的作用。方法:取小鼠24只,随机分为对照组和实验组,分别用生理盐水和100%浓度沙棘浸出液定期给小鼠灌胃,然后进行小鼠抗体产生能力检测、特异玫瑰花环结形成细胞检测(SRFC)、血清IgG检测。结果:实验组以上三项免疫学指标均有显著增高,与对照组相比均有非常显著性差异。结论:沙棘有明显促进小鼠免疫功能增强的作用。

    关键词:沙棘;小鼠免疫功能;研究

    中图分类号:R284文献标识码:A文章编号:1673-2197(2009)01-0038-02

    沙棘(Hippophae rhamnoides L)又名醋柳、酸刺子为胡颓子科多年生灌木或小乔木沙棘的成熟果实和叶。秋、冬二季果实成熟或冻硬时采收,除去杂质,干燥或蒸后干燥。主产于陕西、四川、甘肃、宁夏、山西、辽宁等省。主要功效:益气生津,祛痰止咳,消食止泻,活血散瘀[1]。其化学成分主要有黄酮类、萜类、甾体类、蛋白质和氨基酸类、油和脂肪酸类、挥发油类、有机酸类、糖及微量元素等,是一种营养丰富、药用价值极高的植物[5]。近年来引起国内外学者的极大重视。我们主要进行了沙棘对抗体形成细胞作用的研究,旨在为沙棘的临床应用提供科学依据。
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    1 材料与方法

    1.1仪器与药物

    低温冷冻离心机(Beckmen,美国);美国Multiskan产全自动酶标仪;恒温水浴箱(上海);电泳仪(上海);100目不锈钢网。沙棘(购于附属医院中药房),取100g加水1000mL,文火煎煮2h,去渣浓缩为100mL(浓度为100%)备用。

    1.2 实验动物及分组

    取BALB/C纯系小鼠24只,体重18~22g,雌雄各半,随机分为两组,每组12只,Ⅰ组为生理盐水对照组,Ⅱ组为药物实验组。

    1.3 方法

    Ⅰ组用生理盐水灌胃,1次/d,0.5mL/(次•只),共灌胃10次;Ⅱ组用沙棘液灌胃,1次/d,0.5mL/(次•只),共灌胃10次。
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    1.4 检测项目

    (1)定量溶血分光光度测定法(QHS)[2] 。本法体外测定B细胞产生分泌抗体裂解红细胞所释放的血红蛋白量(以OD值表示),其结果可反映机体体液免疫功能。实验第5天分别将5%的绵羊红细胞0.2mL注入各组小鼠腹腔内。第11天颈椎脱臼处死小鼠,常规取脾脏,制备脾细胞悬液,然后脾细胞计数,调整细胞浓度至1×107/mL,将脾细胞悬液均分,每组每只小鼠设3支试管,每管依次加入脾细胞悬液,0.2%绵羊红细胞(SRBC),1∶10新鲜豚鼠血清(补体)各1mL混匀。另外分别设补体、脾细胞以及SRBC对照管各3支,置37℃水浴1h,2000转/min离心5min。取上清液用96孔细胞培养板于全自动酶标仪450nm波长处测A值,作为QHS反应值。

    (2)特异玫瑰花环形成细胞检测(SRFC)[3] 。取脾细胞0.1mL(1×107/mL),1%SRFC 0.1mL,小牛血清0.1mL,试管内混匀,4℃放置2h,加结晶紫溶液20μL,计数500个淋巴细胞,求出SRFC/106脾细胞的形成率。
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    (3)血清IgG检测[3]。采用对流免疫电泳实验,摘除小鼠眼球取血,分离血清,取不同稀释度血清10μL加入阴极端琼脂板孔中,将琼脂板阳极端孔内加入羊抗鼠IgG(1∶32)10μL,将对流免疫电泳通电30min后观察结果,以血清最高稀释度仍有明显沉淀线为准。结果以稀释度表示。

    2 结果

    (1)沙棘对抗体形成细胞的影响。

    表1结果显示,用药组可促进抗体细胞形成,与对照组相比有显著性差异(P

    (2)沙棘对SRFC的影响。

    表2结果显示,用药组SRFC产生明显增强,与对照组相比有非常显著性差异(P

    (3)沙棘对小鼠IgG的影响。
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    表3结果显示,用药组可明显促进IgG产生。与对照组相比有显著性差异(P<0.01)。

    3 讨论

    沙棘是临床上常用的中药,用于咳嗽痰多、消化不良、食积腹痛、跌打瘀肿等[4,5]。现代研究表明:沙棘能显著增加小鼠血清溶菌酶的含量,极显著地提高绵羊红细胞的滴度,也能提高巨噬细胞的吞噬功能,提高淋巴细胞转化率和自然玫瑰花环形成率,且能明显增加血清IgG的含量;并有抗心肌缺氧的作用、保肝的作用和抗炎抗放射的作用[6,7]。本研究重点从细胞及分子水平探讨沙棘对抗体形成细胞、IgG分子的影响。实验证明,沙棘能增强小鼠抗体形成细胞(B细胞)活性,促进B细胞分化、增殖为浆细胞;沙棘组的QHS值增高与对照组相比有显著性差异(P<0.05),沙棘组SRFC数目明显高于对照组,与对照组相比有非常显著性差异(P<0.01),沙棘组的小鼠血清IgG含量增加,与对照组相比有非常显著性差异(P<0.01)。结果提示机体免疫功能下降者可口服沙棘
, 百拇医药
    以增强机体免疫功能,预防某些疾病。本研究为临床应用沙棘提供了实验依据。

    参考文献:

    [1] 高学敏.中药学[M].下册.北京:人民卫生出版社,2000.

    [2] 徐淑云. 药理学实验方法[M].第2版.北京:人民卫生出版社,1992.

    [3] 高美华,冯献启,李波清,等. 磁场对SP2/O瘤鼠抗体形成细胞的作用研究[J].中华理疗杂志,1998,21(4):225.

    [4] 王本祥.现代中药药理与临床[M].天津:天津科技翻译出版公司,2004.

    [5] 肖培根.新编中药志[M].第二卷.北京:化学工业出版社,2002.

    [6] 邱世翠,李宗山,郭毅,等. 枸杞对辐射损伤小鼠造血功能恢复的影响[J]. 中国中医药科技,2000,7(6):362.

    [7] 高梅,贾镭,陈芬,等. 虎尿对小鼠淋巴细胞增殖和IL-2产生的影响[J]. 中国实验临床免疫学杂志,1999,11(3):39.

    (责任编辑:陈涌涛), http://www.100md.com(宓 伟 鞠艳华)