HBx、ras基因的克隆及精原细胞转染法制备转基因小鼠的初步研究
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张晶晶 岳惠芬 曹骥 苏建家 李瑗 杨春 欧超 班克臣 匡志鹏 广西医科大学附属肿瘤医院 广西医科大学附属肿瘤医院 广西医科大学附属肿瘤医院 广西医科大学附属肿瘤医院 广西医科大学附属肿瘤医院 广西医科大学附属肿瘤医院 广西医科大学附属肿瘤医院 广西医科大学附属肿瘤医院 广西医科大学附属肿瘤医院
【摘要】目的:探索以精原细胞转染法制备乙肝病毒HBx基因及突变ras基因的转基因小鼠的可行性。方法:首先构建携带HBx基因和突变ras基因的真核表达载体pcDNA3.1-HBx及pEGFP-N1-Kras。将上述两种重组载体混合后,用脂质体包被,用注入4只雄性小鼠之睾丸组织中。注射后4周,使上述处理过的雄性小鼠与雌性小鼠合笼交配。小鼠出生后2～4周,剪其尾尖,并以多聚酶链式反应(PCR)对基因整合进行鉴定。结果:共产仔小鼠35只,3只仔小鼠PCR阳性(阳性率8.6%)。其中,两只HBx基因阳性,1只HBx、ras基因均为阳性。结论:以精原细胞作为载体,建立带HBx及ras基因的小鼠模型是可行的,为建立树鼩转基因动物模型的研究打下基础。
【关键词】 HBx Kras 转基因小鼠 精原干细胞
【基金】国家自然科学基金(No.30560168)
【分类号】Q78
朋吕肝细胞癌(HCC)是消化系统中最常见的恶性肿瘤，我国80%的肝癌患者有乙肝病毒(HePatitis B virus，HBV)感染。乙肝病毒X蛋白(HBx)是一种反式激活因子，在促进HCC形成的过程中起着十分重要的作用。ras原癌基因家族是一类低分子量蛋白质，P21为癌基因ras的编码蛋白，由H一ra
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摘要目的：探索以精原细胞转染法制备乙肝病毒HBx 基因及突变ras 基因的转基因小鼠的可行性。方法：首先构建携带HBx 基因和突变ras 基因的真核表达载体pcDNA3.1-HBx 及pEGFP-N1-Kras。将上述两种重组载体混合后，用脂质体包被，用注入4只雄性小鼠之睾丸组织中。注射后4 周，使上述处理过的雄性小鼠与雌性小鼠合笼交配。小鼠出生后2~4 周，剪其尾尖，并以多聚酶链式反应(PCR)对基因整合进行鉴定。结果：共产仔小鼠35 只，3 只仔小鼠PCR 阳性(阳性率8.6%)。其中，两只HBx 基因阳性，1 只HBx、ras基因均为阳性。结论：以精原细胞作为载体，建立带HBx 及ras基因的小鼠模型是可行的，为建立树鼩转基因动物模型的研究打下基础。
关键词：HBx；Kras；转基因小鼠；精原干细胞
中图分类号：Q78；Q813 文献标识码：A 文章编号：1673-6273(2008)02-0205-04
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