生长抑素受体基因特异性shRNA慢病毒表达质粒的构
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摘要目的：设计并合成生长抑素受体SSTR5 基因siRNA 序列，并构建其短发夹shRNA慢病毒表达质粒。方法：以小鼠SSTR5 基因为靶序列，用在线软件分析、设计并合成其有效siRNA，退火形成双链DNA后，与经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切线性化慢病毒表达载体pSHR-P滋ro/GFP连接，产生pLV-shSSTR5重组慢病毒质粒。将重组质粒转化大肠杆菌DH 5琢感受态细胞，PCR 筛选阳性克隆，测序鉴定。结果：构建的重组表达质粒PCR产物为161bp，其中插入的SSTR5-siRNA片段为61bp，测序结果与参考序列完全一致。结论：成功构建了小鼠SSTR5 基因特异性shRNA慢病毒表达质粒，为进一步采用RNAi 技术研究小鼠SSTR5 基因表达对其生长情况的影响奠定了基础。
关键词：SSTR5；RNAi；慢病毒表达载体
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