嗜酸氧化亚铁硫杆菌亚硫酸还原酶的α亚基黄素蛋白(cysJ)的表达、纯化及活性测定
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王敏 曾嘉 黄霞 柳建设 邱冠周 中南大学资源加工与生物工程学院 中南大学资源加工与生物工程学院 中南大学资源加工与生物工程学院 中南大学资源加工与生物工程学院 中南大学资源加工与生物工程学院
【摘要】亚硫酸还原酶是嗜酸氧化亚铁硫杆菌硫氧化还原系统电子传递链的重要组分之一。本文以嗜酸氧化亚铁硫杆菌ATCC23270基因组为模板,通过基因重组技术在大肠杆菌中表达,用一步亲和层析法纯化出浓度和纯度都较高的亚硫酸还原酶的a亚基黄素蛋白(cysJ)。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、紫外可见分光光度法等方法确定其性质并成功测定了活性,为进一步研究亚硫酸还原酶的功能及其应用提供了条件。
【关键词】 嗜酸氧化亚铁硫杆菌 亚硫酸还原酶 黄素蛋白 cysJ SiR-FP
【基金】国家“973”基金(2004CB619204) 国家自然科学创新群体基金(50621063) 全国博士学位论文作者专项资金(200549)
【分类号】Q78
前言嗜酸氧化亚铁硫杆菌(Aeidithiobaeillus ferrooxidans)是革兰氏阴性、化能自养菌，好氧嗜酸，生长在pHI一3的环境中，可以利用亚铁和元素硫作为能源物质生长，是一种重要的浸矿细菌。在工业及生态上它都有比较重要的作用，例如:微生物冶金技术(应用A.ferrooxidans含砷金
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摘要：亚硫酸还原酶是嗜酸氧化亚铁硫杆菌硫氧化还原系统电子传递链的重要组分之一。本文以嗜酸氧化亚铁硫杆菌ATCC23270 基因组为模板，通过基因重组技术在大肠杆菌中表达，用一步亲和层析法纯化出浓度和纯度都较高的亚硫酸还原酶的a 亚基黄素蛋白(cysJ)。通过SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳、紫外可见分光光度法等方法确定其性质并成功测定了活性，为进一步研究亚硫酸还原酶的功能及其应用提供了条件。
关键词：嗜酸氧化亚铁硫杆菌；亚硫酸还原酶；黄素蛋白；cysJ；SiR-FP
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