大肠菌外膜蛋白的分离及其双向电泳图谱的建立
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摘要：本文利用温度诱导的两相分离萃取技术选择性分离未经机械破碎的大肠杆菌细胞外膜蛋白，研究Tnton x-114的浓度及处理时间对提取外膜蛋白的影响。实验结果表明，Triton x-114的使用浓度和作用时间均显著影响外膜蛋白的提取效率。SDS- PAGE结果表明不同Triton x-114的使用浓度和作用时间只是影响了外膜蛋白的提取效率而对外膜蛋白提取的种类没有影响。实验发现8%的Triton x-114处理3小时为最佳分离条件，分离得到的样品可用于双向电泳分析。通过对比实验发现样品裂解液中包含低浓度的Tris是外膜蛋白双向电泳成功的关键因素，CHAPS与ASB-14或NP-40结合使用可显著提高外膜蛋白的溶解能力，缩短聚焦时间，从而优化了大肠杆菌外膜蛋白双向电泳技术体系，建立了其双向电泳图谱。
关键词：大肠杆菌；外膜蛋白；Triton x-114；双向电泳
中图分类号：Q591.2 文献标识码：A 文章编号：1673-6273(2009)02-201-04
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