阳离子脂质体对HepG2.2.15细胞病毒分泌、毒性及凋亡的影响
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朱晓莹 汪云霞 邓益斌 王燕菲 广州医学院生化教研室;
【摘要】目的:探讨阳离子脂质体作为基因治疗药物载体对HepG2.2.15细胞的病毒分泌、毒性及凋亡的研究。方法:以2.5、5.0、7.5、10.0μL/mL浓度的阳离子脂质体转染HepG2.2.15细胞,共温育10d,ELISA法检测细胞上清中HBsAg和HBeAg含量的变化。转染48h后,MTT法检测阳离子脂质体对细胞的毒性、荧光显微镜检测细胞凋亡情况。结果:各个剂量组阳离子脂质体对HepG2.2.15细胞均有抑制作用,其中10μL/mL组在第10d对HBsAg、HBeAg抑制率分别达31.5%、29.9%,表现出较高的毒性作用。2.5、5.0、7.5、10.0μL/mL阳离子脂质体转染HepG2.2.15细胞后,MTT检测结果显示其细胞存活率分别为82.14%、77.62%、77.4%、61.9%。荧光显微镜下可见各浓度组均有凋亡,且随脂质体剂量增加细胞凋亡数增加。结论:阳离子脂质体能抑制HepG2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg,其毒性及诱导凋亡作用呈剂量和时间依赖性。作为基因治疗药物载体时,剂量宜小于7.5μL/mL。
【关键词】 阳离子脂质体 基因治疗 药物载体 毒性
【基金】广州市科技计划项目(编号2002Z3-E4081)
【分类号】R96
前言基因治疗过程中,如果直接将外源基因引入细胞,DNA不容易进入细胞核内且容易被体内的核酸酶降解成小分子核苷酸,从而失去治疗作用。为了保护治疗基因,将它与基因载体结合,使它能发挥较理想的治疗作用。目前常用的基因载体大致分为病毒载体和非病毒载体两类。病毒载体由于
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摘要 目的：探讨阳离子脂质体作为基因治疗药物载体对HepG2.2.15细胞的病毒分泌、毒性及凋亡的研究。方法：以2.5、5.0、7.5、10.0μL/mL浓度的阳离子脂质体转染HepG2.2.15细胞，共温育10 ，ELISA法检测细胞上清中HBsAg和HBeAg含量的变化。转染48h后，MTT法检测阳离子脂质体对细胞的毒性、荧光显微镜检测细胞凋亡情况。结果：各个剂量组阳离子脂质体对HepG2.2.15细胞均有抑制作用。其中10μL/mL组在第10 d对HBsAg、I-IBeAg抑制率分别达31.5%、29.9%，表现出较高的毒性作用。2.5、5.0、7.5、10.0μL/mL阳离子脂质体转染HepG2.2.15细胞后，MTT检测结果显示其细胞存活率分别为82.14%、77.62%、77.4%、61.9%。荧光显微镜下可见各浓度组均有凋亡，且随脂质体剂量增加细胞凋亡数增加。结论：阳离子脂质体能抑制HepG2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg，其毒性及诱导凋亡作用呈剂量和时间依赖性。作为基因治疗药物载体时，剂量宜小于7.5μL/mL。
关键词：阳离子脂质体；基因治疗；药物载体；毒性
中图分类号：R961 文献标识码：A 文章编码：1673—627312009)08—1436—04
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