Mpk与绿色荧光蛋白融合基因的真核载体构建及表达

http://www.100md.com 2009年5月1日 陈彦球　张裕平　徐培林　杨　燕

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     摘要 目的：探索Mpl与绿色荧光蛋白GFP基因共同转染哺乳动物细胞N1H3T3的方法。方法：采用PCR方法将GFP基因与Mpl基因构建融合荧光蛋白的真核表达载体，用脂质体介导转染NIH3T3细胞和筛选稳定细胞系，使用荧光显微镜方法和Western blotting检测转染效果。结果：利用PCR方法有效扩增了Mpl基因，构建了融合荧光蛋白的真核表达载体，序列分析表明所构建的含Mpl基因的质粒与设计相同，使用荧光显微镜方法和Western blotting检测Mpl融合绿色荧光蛋白表达载体成功转染NIH3T3细胞。结论：成功构建了Mpl荧光表达载体，融合基因可以在NIH3T3细胞中稳定表达，为进一步研究Mpl的生物学活性及其与hNUDC蛋白相互作用提供了重要的理论依据。

    关键词：Mpl；GFP；NIH3T3细胞

    中图分类号：R392.12

    文献标识码：A

    文章编号：1673-6273(2009)09-1612-04

    http://www.100md.com/html/paper/1673-6273/2009/09/04.htm

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