昆明小鼠胚胎成纤维细胞的分离与培养
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邵晓云 黄岚珍 孙莉 徐绍业 桂林医学院组织学与胚胎学教研室;桂林医学院科技处;
【摘要】目的:建立稳定高效的小鼠胚胎成纤维细胞饲养层培养体系。方法:取不同胎龄的小鼠分离原代胚胎成纤维细胞,观察不同胎龄小鼠对分离和培养效果的影响。结果:从不同胎龄小鼠均分离得到胚胎成纤维细胞,但最佳分离时间为13.5～14.5d;传代时在室温下消化单层贴壁细胞可随时控制消化时间,效果良好。结论:从13.5～15.5d胎龄小鼠胚胎分离培养胚胎成纤维细胞效果最佳。
【关键词】 小鼠胚胎成纤维细胞 分离 培养
【基金】基础医学院科研启动基金(JCKY200901)
【分类号】Q813.1
前沿胚胎干细胞(Embryonic Stem Cell,ESC)是由囊胚的内细胞团(Inner Cell Mass,ICM)分离培养的具有全能分化特性的细胞,具有长期自我增殖、自我更新和多向分化的潜能,能够再生出各种功能细胞和组织器官。体外培养ESC的基本原则是在促进ESC增殖的同时,维持其未分化的二倍体状
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前沿
胚胎干细胞(Embryonic Stem Cell，ESC)是由囊胚的内细胞团(InnerCell Mass，ICM)分离培养的具有全能分化特性的细胞，具有长期自我增殖、自我更新和多向分化的潜能，能够再生出各种功能细胞和组织器官。体外培养ESC的基本原则是在促进ESC增殖的同时，维持其未分化的二倍体状态，保持其向三个胚层细胞分化的潜能。ESC体外培养主要采用饲养层培养法，目前使用最普遍的饲养层细胞有小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse Embryonic Fibroblast，MEF)及小鼠成纤维细胞无限系(STO)细胞。MEF作为饲养层培养ESC是一种最常用的方法，它能有效地促进ESC的增殖并维持其未分化性和多潜能性。可用于大多数动物ESC的分离，大多数实验室均采用该细胞。本试验以昆明小鼠为材料，通过取材、原代培养、传代及纯化、冻存与复苏培养小鼠胚胎成纤维细胞，以期为进一步培养胚胎千细胞(ESC)提供实验基础。
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