renalase在人近曲肾小管上皮细胞系的表达与分泌
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邹林林 顾蓉 白剑 徐标 南京医科大学附属鼓楼临床医学院心脏科;南京大学医学院附属南京鼓楼医院心脏科;南京鼓楼医院心脏科;
【摘要】目的:探讨renalase在人近曲肾小管上皮细胞系(HK-2)的表达与分泌,为进一步研究细胞水平renalase及其通路建立稳定的实验平台。方法:以HK-2细胞系作为研究材料。①应用Westernblot方法检测renalase蛋白的表达。②用real-timePCR方法检测renalasemRNA表达的变化。③用ELISA方法检测细胞上清液中renalase的浓度。结果:在mRNA水平及蛋白水平均检测到renalase表达。结论:首次在mRNA水平及蛋白水平证实了HK-2细胞能够表达renalase,为进一步研究儿茶酚胺或缺血缺氧刺激下细胞renalase的表达奠定了基础。
【关键词】 renalase 肾小管上皮细胞 细胞培养
【基金】江苏省卫生厅医学重点人才项目(RC2007001)
【分类号】R692
前言HK-2细胞是用人乳头(状)瘤病毒(HPV)的E6、E7开放读码框架转染原代培养的人近曲肾小管上皮细胞,建立永生化的肾小管细胞系[1]。2005年Jianchao Xu等[2]研究发现肾脏分泌一种新的蛋白质,被称之为“renalase”,人类renalase在肾脏表达最高,在肾小球及近曲小管均有表达,此外
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前言
HK-2细胞是用人乳头(状)瘤病毒(HPv)的E6、E7开放读码框架转染原代培养的人近曲肾小管上皮细胞，建立永生化的肾小管细胞系。2005年Jianchao Xu等研究发现肾脏分泌一种新的蛋白质，被称之为“renalase”，人类renalase在肾脏表达最高，在肾小球及近曲小管均有表达，此外在心脏、骨骼肌和小肠也有表达。体内实验显示renalase是依赖黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)的单胺氧化酶，可在血浆和尿液中检测到，该酶可降解循环中的儿茶酚胺从而降低交感神经系统的活性，继而调节心脏功能和血压。但目前对renalase在HK-2的表达及调控尚未报道，本研究旨在从mRNA水平及蛋白水平全面探讨renalase在HK-2细胞的表达与分泌，以为后续的HK-2细胞在儿茶酚胺或缺氧刺激下renalase的表达调控建立有价值的体外实验模型。
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