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编号:11954035
氧化应激对肝星状细胞转录因子Nrf2核转位的影响
http://www.100md.com 2010年8月1日 郑媛媛 刘震雄 赵曙光 李 强 闻勤生
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    郑媛媛 刘震雄 赵曙光 李强 闻勤生 第四军医大学唐都医院消化内科;

    【摘要】目的:研究细胞转录因子NF-E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2 related factor 2,Nrf2)在大鼠肝星状细胞系HSC-T6中的表达及氧化应激对其核转位的影响。方法:将大鼠肝星状细胞(HSC-T6)分成空白对照组和氧化应激组,氧化应激组加入100mU/ml葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GO)干预2h制备细胞氧化应激模型,空白对照组予以DMEM正常培养未进行GO干预。Western blot方法检测Nrf2总蛋白及核蛋白的变化,细胞免疫化学法观察HSC-T6细胞Nrf2核转位情况,流式细胞术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平的变化,分光光度法检测细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平。结果:1氧化应激组ROS及MDA水平较空白对照组显著升高(P0.01)。2WB显示Nrf2总蛋白在两组的表达无显著差异,而Nrf2核蛋白在空白对照组中无明显表达,在氧化应激组表达明显增加;ICC显示空白对照组中Nrf2蛋白仅在胞浆中表达;而氧化应激组胞核和胞浆中均可见Nrf2蛋白表达。3氧化应激组GSH水平较空白对照组显著升高(P0.01)。结论:在氧化应激过程中Nrf2发生核转位从而发挥其生物学功能。

    【关键词】 Nrf 大鼠肝星状细胞系HSC-T 氧化应激

    【分类号】R575.2

    前言肝星状细胞(HSC)是肝脏的一种非实质细胞,它能够在氧化应激的刺激下活化并分泌大量细胞外基质引起肝纤维化,目前被公认是预防和治疗肝脏疾病发展的重要靶细胞[1]。Nrf2是一种新近发现的转录因子,它可以启动多种抗氧化酶及Ⅱ相酶的活化,在细胞抵御氧化应激反应的机制中发
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     前言

    肝星状细胞(Hsc)是肝脏的一种非实质细胞,它能够在氧化应激的刺激下活化并分泌大量细胞外基质引起肝纤维化,目前被公认是预防和治疗肝脏疾病发展的重要靶细胞。Nrf2是一种新近发现的转录因子,它可以启动多种抗氧化酶及Ⅱ相酶的活化,在细胞抵御氧化应激反应的机制中发挥重要作用。目前关于Nrf2的研究大都集中在神经系统和呼吸系统等领域,而对于Nrf2在肝星状细胞中的作用及机制未见报道。本实验拟在观察和研究Nrf2在肝星状细胞中的表达及其在氧化应激条件下的反应,从而为肝脏疾病的预防和治疗提供新的靶点和思路。

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