生物活性肽Lunasin的原核表达和分离纯化
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盖文丽 颜冬菁 王伟 陈孝平 陈正望 华中科技大学分子生物物理教育部重点实验室;
【摘要】目的:利用基因工程的方法在大肠杆菌中表达并纯化生物活性肽Lunasin。方法:将合成的Lunasin基因插入原核表达载体pET-32a(+)的多克隆位点Nde I和Xho I之间,然后将重组载体转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,利用IPTG诱导表达蛋白,经SDS-PAGE和Western Blot鉴定蛋白的表达。然后利用亲和层析技术将含有6×His标签的蛋白分离纯化、脱盐、冻干。结果:①鉴定结果表明在6kDa位置出现目的条带Lunasin重组蛋白。②亲和层析在100mM咪唑时得到了洗脱的重组蛋白。结论:在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达并且纯化出了生物活性肽Lunasin。
【关键词】 原核表达 亲和层析 IPTG
【基金】国家自然科学基金(30470823)
【分类号】Q75
前言生物活性肽,是产生于胃肠消化或食物加工过程,在代谢调控中起重要作用的从二肽到复杂的线性、环形结构的不同肽类的总称[1]。研究表明,生物活性肽作为营养制品和功能性食品成分,可能对促进健康和降低患病风险具有功能。活性肽易于被人体消化吸收,有促进免疫、抗菌、抗炎
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前言
生物活性肽，是產生于胃肠消化或食物加工过程，在代谢调控中起重要作用的从二肽到复杂的线性、环形结构的不同肽类的总称。研究表明，生物活性肽作为衍养制品和功能性食品成分，可能对促进健康和降低患病风险具有功能。活性肽易于被人体消化吸收，有促进免疫、抗菌、抗炎、抗病海、降血压、降血脂、激素调节等作用，并且食用安全性较高，是当前国际食品届研究最热门课题之一。
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